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zyzhappy

新虫 (初入文坛)

[求助] western内参有杂带

我想问一下，我是做原核生物表达的蛋白的，下面的图是我用单抗杂的GAPDH的图，箭头所指的地方差不多就是GAPDH的位置，但是不知道为什么会有两条很相近的带，也不知道那一条是正确的。而且在上面还有很多的杂带，有木有哪位大神帮忙解释一下，提点改进的办法，减少这些杂带？
我的方法是：80v跑浓缩胶，120v跑分离胶；转膜72v 1.5h; 5%的脱脂奶粉（TBS稀释）封闭1-2h；用TBS配成1.5%脱脂奶粉稀释一抗（1:10000），4°C孵育过夜。TBS稀释二抗（1:10000），室温1h孵育，然后去显影。
求帮助，求帮助！！~

western内参有杂带
图片1.png
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1楼 2015-03-13 21:21:51
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