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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 单抗western有杂带，如何去除
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奔跑的螃蟹

铁虫 (初入文坛)

[交流] 单抗western有杂带，如何去除 已有4人参与

我的单抗western有杂带，如何去除，请大家指点
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谁的江湖战出来
1楼 2012-09-06 09:32:56
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weishu杯子

银虫 (初入文坛)
★
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可能是因为一抗的特异性不强，或者是一抗的抗原不纯
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快乐源于生活!!
2楼2012-09-06 12:51:57
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hellokkzhu

木虫 (小有名气)
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小丹木木: 金币+3, 鼓励交流 2012-09-06 13:55:31
单抗不存在抗原不纯的问题。不管抗原怎样，最后单克隆杂交瘤只产生抗一个抗原决定簇的抗体，所以才叫单抗。
遇到这种情况可以考虑用5%BSA封闭，并适当延长封闭时间，降低一抗浓度。
有个别情况，杂带去不掉，因为杂带的蛋白和目的蛋白有同源序列，都可以被抗体识别，这时候只能根据分子量标明目的条带即可。
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3楼2012-09-06 13:34:23
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雨独步

铁杆木虫 (著名写手)
★
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做western有杂带挺常见的，而且有些是很难去掉的，不影响的话，就那么用着吧！
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4楼2012-09-10 20:13:25
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myfinalway

木虫 (正式写手)
★
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有些时候 也可能是你要检测的蛋白 本身就存在2个大小的带，所以WB出来就是2条。
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5楼2012-11-07 15:21:40
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