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奔跑的螃蟹

铁虫 (初入文坛)

[交流] 单抗western有杂带,如何去除 已有4人参与

我的单抗western有杂带,如何去除,请大家指点
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谁的江湖战出来
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weishu杯子

银虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可能是因为一抗的特异性不强,或者是一抗的抗原不纯
快乐源于生活!!
2楼2012-09-06 12:51:57
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hellokkzhu

木虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
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小丹木木: 金币+3, 鼓励交流 2012-09-06 13:55:31
单抗不存在抗原不纯的问题。不管抗原怎样,最后单克隆杂交瘤只产生抗一个抗原决定簇的抗体,所以才叫单抗。
遇到这种情况可以考虑用5%BSA封闭,并适当延长封闭时间,降低一抗浓度。
有个别情况,杂带去不掉,因为杂带的蛋白和目的蛋白有同源序列,都可以被抗体识别,这时候只能根据分子量标明目的条带即可。
3楼2012-09-06 13:34:23
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雨独步

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
做western有杂带挺常见的,而且有些是很难去掉的,不影响的话,就那么用着吧!
4楼2012-09-10 20:13:25
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myfinalway

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
有些时候 也可能是你要检测的蛋白 本身就存在2个大小的带,所以WB出来就是2条。
5楼2012-11-07 15:21:40
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