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syp719木虫 (正式写手)
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SSR-PCR 杂带很多 求解决方案 已有2人参与
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此图为SSR-PCR产物非变性PAGE电泳图谱，marker为20bp,第四条带为200bp,二倍体植物为什么这么多带，退火温度左边1-8为63.4度，右边8个为61.9度，上下游引物Tm值分别为59.8℃，59.6℃，是模板纯度不够还是PCR程序不适合还是反应体系不合适呢？求各位老师同学提供宝贵意见建议！谢谢！！！！ 【备注：10ul反应体系PCRmix5-6ul,premierF/R各0.5ul,模板1ul(约40ng），ddH20补齐。 反应程序：94℃ 4min,94℃ 50S,63.4℃ 50S,72℃ 30S,30cycle,72℃ 7min, 电泳上样2ul,电泳40min,硝酸银染色，氢氧化钠甲醛溶液显色】  DSC04720.JPG |
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