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zyzhappy

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[求助] western内参有杂带

我想问一下,我是做原核生物表达的蛋白的,下面的图是我用单抗杂的GAPDH的图,箭头所指的地方差不多就是GAPDH的位置,但是不知道为什么会有两条很相近的带,也不知道那一条是正确的。而且在上面还有很多的杂带,有木有哪位大神帮忙解释一下,提点改进的办法,减少这些杂带?
我的方法是:80v跑浓缩胶,120v跑分离胶;转膜72v 1.5h; 5%的脱脂奶粉(TBS稀释)封闭1-2h;用TBS配成1.5%脱脂奶粉稀释一抗(1:10000),4°C孵育过夜。TBS稀释二抗(1:10000),室温1h孵育,然后去显影。
求帮助,求帮助!!~

western内参有杂带
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