24小时热门版块排行榜    

查看: 1287  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

rescuz

金虫 (小有名气)

[求助] 求分析蛋白电泳图象 已有2人参与

如题,分析蛋白电泳图像,左边2条是marker最右边的也是marker,中间是不同诱导剂浓度下诱导处理得到的蛋白,诱导剂浓度逐渐增加,但是点样时,样品压不成行,有扩散到附近孔,我的目的蛋白是14kd左右,marker最小带式10kd,但是觉得样品泳道越往下越看不清楚,而且图形质量也不很好,求请教蛋白上样要注意什么,样品前处理要 注意什么,或者是配胶的问题,怎么改进,希望大家多多出主意,

求分析蛋白电泳图象
iptg不同浓度诱导蛋白 2015-02-07 14hr 50min.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rescuz

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by zhang001zh at 2015-03-04 14:14:32
我一般都是1:10~20破菌,离心后煮五分钟上样,2-5ul,全程200v 一般都还跑的可以
...

嗯,是200v来着
9楼2015-03-04 15:12:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

zhang001zh

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
跑的好丑  上样量略微有点大  破菌液一般上2-4ul就可以了,稀释一下上样会更好,上样前样品要煮透

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2015-03-03 16:20:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rescuz

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhang001zh at 2015-03-03 16:20:35
跑的好丑  上样量略微有点大  破菌液一般上2-4ul就可以了,稀释一下上样会更好,上样前样品要煮透

我是破碎之后煮沸10min,离心取得上清,上样20ul.你觉得这是样品的原因?
4楼2015-03-03 20:03:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

在下狒狒

新虫 (初入文坛)

我也存在这个问题,跑到低分子量的时候,条带就模糊了。坛子里面有大神说是跑分离胶的时候电压过大导致低分子量蛋白迁移不规律造成的,说把电压降到80v可能好点。我还没试,想再看看原理再试,欢迎讨论。

P.S. 可能是上样量过大造成的,我一般上样前都会测一下浓度,将上样浓度调整到100ug/ml左右。
5楼2015-03-03 20:22:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-29 17:22 by 4FFAWE8HcgUD
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +5 德尚中行 2026-08-27 5/250 2026-08-29 16:16 by manplx
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +9 苏东坡二世 2026-08-23 9/450 2026-08-29 14:41 by hustersqt
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 4/200 2026-08-29 14:13 by jCd0dEvKHShX
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-29 11:40 by jCd0dEvKHShX
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +3 349506619 2026-08-28 3/150 2026-08-29 10:49 by 木风9012
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +16 爱看书的可乐 2026-08-26 18/900 2026-08-29 10:18 by winsaint
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 明天应该可查了!? +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
请填处理意见