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sxy900803

木虫 (小有名气)

[求助] 求助分析电泳图

初次接触分子生物,菜鸟一枚,望大家伙不吝赐教:
图为本人最近两次提取土壤DNA的琼脂凝胶电泳图,最左侧的是Maker,目标条带1500bp左右,大家帮忙分析分析为什么跑胶后总是出现拖尾?而没有目标条带?
求助分析电泳图
2.jpg


求助分析电泳图-1
1.jpg
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jonathan1983

铁虫 (小有名气)

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-10-24 18:21:20
你提的DNA是基因组DNA吗?基因组DNA不会集中出现在某个位置,像你说的1500bp左右。如果想得到目标条带,需要利用特异引物进行PCR再跑电泳。
2楼2013-10-24 10:29:55
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sxy900803

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jonathan1983 at 2013-10-24 10:29:55
你提的DNA是基因组DNA吗?基因组DNA不会集中出现在某个位置,像你说的1500bp左右。如果想得到目标条带,需要利用特异引物进行PCR再跑电泳。

这是我PCR后跑的电泳图,怎么成这样了?能帮忙看看吗?谢谢了
求助分析电泳图-2
3.jpg

3楼2013-10-25 10:40:38
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漠北狼1

金虫 (小有名气)

是不是dna没提出来啊
4楼2013-10-25 11:15:06
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樱落夕

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-10-25 13:21:55
我也觉得是DNA没有提取出来,要不就是纯度不够,先不要跑PCR,先检测下有没有了在跑PCR吧
5楼2013-10-25 13:21:08
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探花花

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
感觉就是没有条带   下面的应该都是引物二聚体
相信什么才会得到什么
6楼2013-10-25 16:11:54
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wqertyre

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-10-30 22:50:42
从你的图来看,基因组DNA根本就没提取出来,如果提取出来的话电泳应该在上样孔附近,DNA就没提取出来,PCR就更不可能做出来了,建议楼主还是确定提取出来基因组了再做PCR
善由心生
7楼2013-10-25 20:35:04
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867575969

至尊木虫 (著名写手)

One Piece

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-10-30 22:50:49
你先不pcr跑个胶看提的dna怎样,如果还不错就是pcr体系有问题,可以自己重新设计下体系,另外pcr所用引物多用几条试试,希望有帮助!
有些东西因为得不到而变得美好,有些东西因为拥有而变得弥足珍贵!
8楼2013-10-26 10:50:40
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jonathan1983

铁虫 (小有名气)

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-10-30 22:50:58
引用回帖:
3楼: Originally posted by sxy900803 at 2013-10-25 10:40:38
这是我PCR后跑的电泳图,怎么成这样了?能帮忙看看吗?谢谢了

3.jpg
...

很明显没P出来,没有目的带。基因组DNA的浓度,退火温度都可能会影响。对于土壤DNA不知道有没有什么特别的地方,如果GC含量很高的话,可以用专门的聚合酶
9楼2013-10-28 16:24:35
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tyiuryiuyo

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
gyesang: 金币+1, 鼓励交流! 2013-10-30 22:51:06
我觉得应该是没有p出来下面的条带是引物二聚体,重新提一下dna吧或者再pcr一次
10楼2013-10-30 15:28:00
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