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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助分析电泳图
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sxy900803

木虫 (小有名气)

[求助] 求助分析电泳图

初次接触分子生物，菜鸟一枚，望大家伙不吝赐教：
图为本人最近两次提取土壤DNA的琼脂凝胶电泳图，最左侧的是Maker，目标条带1500bp左右，大家帮忙分析分析为什么跑胶后总是出现拖尾？而没有目标条带？
求助分析电泳图
2.jpg


求助分析电泳图-1
1.jpg
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1楼 2013-10-24 10:15:41
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jonathan1983

铁虫 (小有名气)
★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-10-24 18:21:20
你提的DNA是基因组DNA吗？基因组DNA不会集中出现在某个位置，像你说的1500bp左右。如果想得到目标条带，需要利用特异引物进行PCR再跑电泳。
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2楼2013-10-24 10:29:55
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sxy900803

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jonathan1983 at 2013-10-24 10:29:55
你提的DNA是基因组DNA吗？基因组DNA不会集中出现在某个位置，像你说的1500bp左右。如果想得到目标条带，需要利用特异引物进行PCR再跑电泳。

这是我PCR后跑的电泳图，怎么成这样了？能帮忙看看吗？谢谢了
求助分析电泳图-2
3.jpg
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3楼2013-10-25 10:40:38
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漠北狼1

金虫 (小有名气)
是不是dna没提出来啊
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4楼2013-10-25 11:15:06
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樱落夕

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-25 13:21:55
我也觉得是DNA没有提取出来，要不就是纯度不够，先不要跑PCR,先检测下有没有了在跑PCR吧
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5楼2013-10-25 13:21:08
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探花花

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
感觉就是没有条带   下面的应该都是引物二聚体
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相信什么才会得到什么
6楼2013-10-25 16:11:54
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wqertyre

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-30 22:50:42
从你的图来看，基因组DNA根本就没提取出来，如果提取出来的话电泳应该在上样孔附近，DNA就没提取出来，PCR就更不可能做出来了，建议楼主还是确定提取出来基因组了再做PCR
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善由心生
7楼2013-10-25 20:35:04
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867575969

至尊木虫 (著名写手)

One Piece

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-30 22:50:49
你先不pcr跑个胶看提的dna怎样，如果还不错就是pcr体系有问题，可以自己重新设计下体系，另外pcr所用引物多用几条试试，希望有帮助！
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有些东西因为得不到而变得美好，有些东西因为拥有而变得弥足珍贵！
8楼2013-10-26 10:50:40
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jonathan1983

铁虫 (小有名气)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-30 22:50:58
引用回帖:
3楼: Originally posted by sxy900803 at 2013-10-25 10:40:38
这是我PCR后跑的电泳图，怎么成这样了？能帮忙看看吗？谢谢了

3.jpg
...

很明显没P出来，没有目的带。基因组DNA的浓度，退火温度都可能会影响。对于土壤DNA不知道有没有什么特别的地方，如果GC含量很高的话，可以用专门的聚合酶
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9楼2013-10-28 16:24:35
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tyiuryiuyo

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-10-30 22:51:06
我觉得应该是没有p出来下面的条带是引物二聚体，重新提一下dna吧或者再pcr一次
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10楼2013-10-30 15:28:00
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