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HPLC梯度洗脱强度范围如何确定等度洗脱强度 已有1人参与
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在看实用高效液相色谱法的建立这本书里面有一节是通过梯度洗脱首峰和末峰的洗脱强度和保留时间估计等度洗脱所需的洗脱强度。但是我怎么看也没看明白。还请各位大神指点迷津。 无标题.png |
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重新看了下，可能我和楼主对书上这段话的理解有偏差 这段话其实是说明一种确定梯度程序的方法 还是我刚才的描述 你甲醇+水走梯度，甲醇4%/min，从0到50%， 有A和B 两个物质要分离 A在5分钟出峰，对应甲醇是20% B在10分钟出峰，对应甲醇是40% 那么现在要初步确定一个方法来分离A和B，这个方法应该是这样的： 20%等度走5分钟，然后开始4%/min提高浓度到40%，之后以40%浓度等度洗脱 然后经过微调等度洗脱的时间和甲醇浓度提升的速度，保证A在20%，B在40%等度洗脱的阶段出峰。 =========================================== 如果你要选择一个完全等度洗脱的方案，那么推荐值在书上说的中间点。 关于后面的0.4 的问题，我是觉得没必要卡这个数值 这主要还是看实际分析中，你是否能接受A和B分开太远。 比如梯度下，AB 相差5分钟，30%等度相差时间20分钟，你可以用梯度程序，如果相差不过6~8分钟，给我就不会用梯度程序了。 ===== 不知道楼主用过气相色谱没，其实这个和程序升温差不多。用过应该会比较好理解。 |
4楼2015-03-01 14:28:33