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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 过反相C18柱子，梯度洗脱怎么确定？
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雷焕

银虫 (小有名气)

[求助] 过反相C18柱子，梯度洗脱怎么确定？

现在准备过反相C18柱子，使用30%甲醇-水冲，慢慢调高甲醇比例，比例怎么调合适，30%后是40%呢还是50%呢？还有水是用蒸馏水还是去离子水？非常感谢！
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平静滴表面遮掩不住内心滴波澜！
1楼 2013-09-03 11:57:33
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bbdd2012

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
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雷焕: 金币+5, ★★★很有帮助, 非常感谢！ 2013-09-03 14:03:58
xiaoxiao270: 金币+1 2013-09-03 19:58:07
比例看你自己了，你时间充裕想看看哪种比例的分的最好那就一点一点往上调，我们一般情况下都是20%的往上调，水我们用的是二次蒸馏水，也有人直接去超市买娃哈哈纯净水，当然你要是有去离子水用去离子水当然更好
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只要结局是好的，也无所谓我一路悲喜交加的狂奔...
2楼2013-09-03 13:11:23
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zzjcust

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
雷焕: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢！ 2013-09-04 10:15:04
这个还是要结合实际，根据点板等检测情况来定，最好不要图快，比例变化小一点，效果好，虽然慢点，但比你下一步分不开合起来再上柱省事，损失也少
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3楼2013-09-04 10:06:19
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天泊一心

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
雷焕: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢！ 2013-09-04 10:15:20
能等度洗脱就等度洗脱吧，尽量不要梯度洗脱，我们这是从10%开始的，比例要慢慢调，这样基线才会平滑点。
至于你说的水，我们这和1L一样是用的双蒸水，但实际上是哇哈哈方便，个人也推荐哇哈哈
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路漫漫其修远兮
4楼2013-09-04 10:12:23
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zt830423

银虫 (初入文坛)
建议通过HPLC摸条件，
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科学家离我很遥远
5楼2013-09-04 10:19:58
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gslzzhixin

铁杆木虫 (正式写手)
过反相柱还是将部位粗画段，没有必要做得太细，极性跨度可以大一些。
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

雷焕
6楼2013-09-04 18:41:54
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雷焕

银虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by gslzzhixin at 2013-09-04 18:41:54
过反相柱还是将部位粗画段，没有必要做得太细，极性跨度可以大一些。

谢谢！我将部位细分！
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平静滴表面遮掩不住内心滴波澜！
7楼2013-09-04 18:57:44
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dela

铁虫 (初入文坛)
是不是应该先在HPLC上摸一下条件，确定样品是在多少的甲醇浓度下出峰，可跑5-95的宽梯度，计算出甲醇浓度后，再设一个窄梯度过样品
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8楼2013-09-06 08:43:42
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踏径

木虫 (小有名气)
水是要过0.45um滤膜的 哇哈哈也可以 但最好过一下滤膜 去离子水一般不用 用纯水机制得超纯水也可以
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走走停停再走
9楼2013-09-06 11:52:43
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e_liang369

金虫 (正式写手)
先10-90%甲醇30min走一针，再根据所走的情况调整梯度
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悲催的研发！
10楼2013-09-06 16:31:26
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