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雷焕

银虫 (小有名气)

[求助] 过反相C18柱子,梯度洗脱怎么确定?

现在准备过反相C18柱子,使用30%甲醇-水冲,慢慢调高甲醇比例,比例怎么调合适,30%后是40%呢还是50%呢?还有水是用蒸馏水还是去离子水?非常感谢!
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bbdd2012

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
雷焕: 金币+5, ★★★很有帮助, 非常感谢! 2013-09-03 14:03:58
xiaoxiao270: 金币+1 2013-09-03 19:58:07
比例看你自己了,你时间充裕想看看哪种比例的分的最好那就一点一点往上调,我们一般情况下都是20%的往上调,水我们用的是二次蒸馏水,也有人直接去超市买娃哈哈纯净水,当然你要是有去离子水用去离子水当然更好
只要结局是好的,也无所谓我一路悲喜交加的狂奔...
2楼2013-09-03 13:11:23
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zzjcust

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
雷焕: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢! 2013-09-04 10:15:04
这个还是要结合实际,根据点板等检测情况来定,最好不要图快,比例变化小一点,效果好,虽然慢点,但比你下一步分不开合起来再上柱省事,损失也少
3楼2013-09-04 10:06:19
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天泊一心

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
雷焕: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢! 2013-09-04 10:15:20
能等度洗脱就等度洗脱吧,尽量不要梯度洗脱,我们这是从10%开始的,比例要慢慢调,这样基线才会平滑点。
至于你说的水,我们这和1L一样是用的双蒸水,但实际上是哇哈哈方便,个人也推荐哇哈哈
路漫漫其修远兮
4楼2013-09-04 10:12:23
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zt830423

银虫 (初入文坛)

建议通过HPLC摸条件,
科学家离我很遥远
5楼2013-09-04 10:19:58
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gslzzhixin

铁杆木虫 (正式写手)

过反相柱还是将部位粗画段,没有必要做得太细,极性跨度可以大一些。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

6楼2013-09-04 18:41:54
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雷焕

银虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by gslzzhixin at 2013-09-04 18:41:54
过反相柱还是将部位粗画段,没有必要做得太细,极性跨度可以大一些。

谢谢!我将部位细分!
平静滴表面遮掩不住内心滴波澜!
7楼2013-09-04 18:57:44
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dela

铁虫 (初入文坛)

是不是应该先在HPLC上摸一下条件,确定样品是在多少的甲醇浓度下出峰,可跑5-95的宽梯度,计算出甲醇浓度后,再设一个窄梯度过样品
8楼2013-09-06 08:43:42
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踏径

木虫 (小有名气)

水是要过0.45um滤膜的 哇哈哈也可以 但最好过一下滤膜 去离子水一般不用 用纯水机制得超纯水也可以
走走停停再走
9楼2013-09-06 11:52:43
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e_liang369

金虫 (正式写手)

先10-90%甲醇30min走一针,再根据所走的情况调整梯度
悲催的研发!
10楼2013-09-06 16:31:26
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