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TLC菜鸟

金虫 (正式写手)

[求助] 正相柱与反相柱的洗脱顺序

因基础知识不扎实,对正相柱与反相柱的洗脱顺序十分不解,求高手指教。。
   使用时为了能够让组分依次洗脱出来,梯度洗脱流动相的极性是应该怎么变化,水和有机相的比例应该是怎么变化,原理是什么呀?
  真希望各位大哥大姐能够帮帮我,谢谢,真的谢谢。

[ 来自科研家族 药物制剂 ]

[ Last edited by TLC菜鸟 on 2011-11-15 at 21:32 ]
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只为活个问心无愧。。
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wanggch123

荣誉版主 (文坛精英)

王版

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

这个建议去图书馆找本分离的书

否则一句两句也说不明白的。
努力奋斗,人生终将辉煌!
2楼2011-11-15 22:32:24
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

TLC菜鸟(金币+2): 我清楚是差速迁移,我想了解的是,这个差速迁移的原因是什么,比如分子间的作用力 2011-11-15 23:40:48
梯度洗脱,差速迁移。
梯度:调节流动相比例,达到调节极性目的,引起分子差速洗脱。
守候在风中的宁静。
3楼2011-11-15 22:41:32
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豆哥

主管区长 (职业作家)

制粒能手

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


novus(金币+1): 谢谢交流! 2011-11-16 21:19:50
TLC菜鸟(金币+5): 为什么反相柱的洗脱顺序极性大的先出来呢?是什么原理呀 2011-11-18 18:49:47
1. 正相柱洗脱的时候组分是按照极性从小到大的顺序洗脱下来的,洗脱剂(如甲醇、乙腈、正己烷等)极性从小到大,常用填料为硅胶等;
反相柱洗脱的时候组分是按照极性从大到小的顺序洗脱的,洗脱剂(如甲醇-水)性从大到小选择,常用的填料有ODS等。
2. 差速迁移机制,分配色谱(分配系数)、吸附色谱(物理吸附)、离子交换色谱(离子交换)、空间排阻色谱(分子大小)各有不同。
边学边问,才有学问。
4楼2011-11-16 11:36:26
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春江花都

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-11-20 10:53:06
正相系统换反相系统注意事项


  
        在液相色谱仪使用过程中,我们经常遇到液相色谱仪用户正反相色谱系统互相现象,但由于使用操作不当,常常不注意间损坏了色谱柱,同时加重了液相色谱系统的污染,导致分析工作出现麻烦,现在将置换工作的基本流程列出,供用户参考:

1. 首先用正己烷(硅胶柱)将色谱系统包括正相柱平衡好(保证20分钟内基线平直,无峰出现);

2. 卸掉硅胶柱,封好保存;

3. 将进样阀与检测器短路,用异丙醇冲洗色谱系统10分钟(流速1ml/min).在这期间空拨进样阀三次;

4.换甲醇(或已睛)冲洗系统20分钟(流速2ml/min) ,此期间空拨进样阀三次;

5. 安上反相色谱柱, 流速调到1ml/min,用甲醇(或已睛)冲洗系统,直到系统平衡;

6.进三针标准品,检验面积 ﹑保留时间是否重复,若不重复,继续冲洗直到重复。


反相系统换正相系统的注意事项



                           反相系统换正相系统的注意事项
1.首先用甲醇(或已腈)将色谱系统包括反相柱平衡好(保证20分钟内基线平直,无峰出现);
2.卸掉反相柱,封好保存;
3.将进样阀与检测器短路,用异丙醇冲洗色谱系统10分钟(流速1ml/min),在这期间空拨进样阀三次;
4.换正己烷(硅胶柱)冲洗系统20分钟(流速2ml/min) , 此期间空拨进样阀三次;
5.安上硅胶色谱柱, 流速调到1ml/min,用正己烷冲洗系统,直到系统平衡;
6.进三针标准品检验面积﹑保留时间是否重复,若不重复,继续冲洗直到重复。
5楼2011-11-19 22:38:14
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6楼2012-11-29 20:55:15
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不爱叫外卖

银虫 (初入文坛)

反相色谱柱,流动相极性大于固定相,极性物质容易溶于流动相,难溶于固定相,在洗脱过程中,容易被流动相洗下来,所以极性性大的先出峰(一般情况下是这样的)
7楼2014-11-06 11:19:12
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