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正相柱与反相柱的洗脱顺序
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因基础知识不扎实，对正相柱与反相柱的洗脱顺序十分不解，求高手指教。。 使用时为了能够让组分依次洗脱出来，梯度洗脱流动相的极性是应该怎么变化，水和有机相的比例应该是怎么变化，原理是什么呀？ 真希望各位大哥大姐能够帮帮我，谢谢，真的谢谢。 [ 来自科研家族 药物制剂 ] [ Last edited by TLC菜鸟 on 2011-11-15 at 21:32 ] |
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wanggch123
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2楼2011-11-15 22:32:24
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豆哥
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【答案】应助回帖
★
novus(金币+1): 谢谢交流！ 2011-11-16 21:19:50
TLC菜鸟(金币+5): 为什么反相柱的洗脱顺序极性大的先出来呢？是什么原理呀 2011-11-18 18:49:47
novus(金币+1): 谢谢交流！ 2011-11-16 21:19:50
TLC菜鸟(金币+5): 为什么反相柱的洗脱顺序极性大的先出来呢？是什么原理呀 2011-11-18 18:49:47
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1. 正相柱洗脱的时候组分是按照极性从小到大的顺序洗脱下来的，洗脱剂（如甲醇、乙腈、正己烷等）极性从小到大，常用填料为硅胶等； 反相柱洗脱的时候组分是按照极性从大到小的顺序洗脱的，洗脱剂（如甲醇-水）性从大到小选择，常用的填料有ODS等。 2. 差速迁移机制，分配色谱（分配系数）、吸附色谱（物理吸附）、离子交换色谱（离子交换）、空间排阻色谱（分子大小）各有不同。 |
4楼2011-11-16 11:36:26
【答案】应助回帖
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jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-11-20 10:53:06
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-11-20 10:53:06
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正相系统换反相系统注意事项 在液相色谱仪使用过程中，我们经常遇到液相色谱仪用户正反相色谱系统互相现象，但由于使用操作不当，常常不注意间损坏了色谱柱，同时加重了液相色谱系统的污染，导致分析工作出现麻烦，现在将置换工作的基本流程列出，供用户参考： 1. 首先用正己烷(硅胶柱)将色谱系统包括正相柱平衡好(保证20分钟内基线平直,无峰出现)； 2. 卸掉硅胶柱，封好保存； 3. 将进样阀与检测器短路，用异丙醇冲洗色谱系统10分钟(流速1ml/min).在这期间空拨进样阀三次； 4.换甲醇(或已睛)冲洗系统20分钟(流速2ml/min) ，此期间空拨进样阀三次； 5. 安上反相色谱柱， 流速调到1ml/min,用甲醇(或已睛)冲洗系统，直到系统平衡； 6.进三针标准品,检验面积 ﹑保留时间是否重复,若不重复,继续冲洗直到重复。 反相系统换正相系统的注意事项 反相系统换正相系统的注意事项 1.首先用甲醇(或已腈)将色谱系统包括反相柱平衡好(保证20分钟内基线平直,无峰出现)； 2.卸掉反相柱，封好保存； 3.将进样阀与检测器短路,用异丙醇冲洗色谱系统10分钟(流速1ml/min)，在这期间空拨进样阀三次； 4.换正己烷(硅胶柱)冲洗系统20分钟(流速2ml/min) ， 此期间空拨进样阀三次； 5.安上硅胶色谱柱， 流速调到1ml/min,用正己烷冲洗系统，直到系统平衡； 6.进三针标准品检验面积﹑保留时间是否重复,若不重复,继续冲洗直到重复。 |
5楼2011-11-19 22:38:14
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