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独恋伊人

新虫 (初入文坛)

[求助] 原反相C18色谱柱如何更换成正相硅胶色谱柱，要注意那些问题

之前高效液相色谱上接的一根C18柱子，现在由于分析需要，我想换上新的正相的纯硅胶色谱柱，流动相也要相应的从甲醇换成异丙醇，应该样操作，要注意哪些问题，求高手指点！
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1楼 2013-11-26 21:06:40
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yjlrx

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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独恋伊人: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-11-27 21:40:04
去掉C18柱，接上两通，异丙醇置换出甲醇，再换上正相柱，即可。
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2楼2013-11-26 21:19:34
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yjlrx

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

正相不能purge，好像会使泵的垫圈膨胀吧。
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4楼2013-11-26 21:40:58
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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crity328: 金币+1, 感谢交流，欢迎常来~ 2013-11-27 08:42:36
独恋伊人: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-11-27 21:40:21
1、虽然使用正相柱，但是只能用异丙醇体系。
2、正己烷之类的溶剂不能使用，因为泵的设计是为反相的，用正相会损害到密封垫或者其他部位。
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5楼2013-11-26 22:27:03
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hexued6933

版主 (著名写手)

日出东方，岂能不败

优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
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crity328: 金币+1, 感谢交流，欢迎常来~ 2013-11-27 08:42:48
独恋伊人: 金币+5 2013-11-27 21:41:03
第一步，讲四管道分别在水和异丙醇中purge 5min，然后都放入ipa中。第二步接双通，0.5min/min,四管路各25％，用乙醇洗20针（设置运行时间0.5min），然后冲系统至少一夜。然后就可以接正相柱了。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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大家好，才是真的好
6楼2013-11-26 22:46:46
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 独恋伊人 at 2013-11-27 10:25:59
啊，这个我还真没注意过这个问题， 我打算用是异辛烷和二氧六环来做流动相做实验，那是不是也会出问题？...

异辛烷和二氧六环的具体性质我也不是很清楚，可以查查相关资料，但是有一点，就是不要使用纯粹的正相溶剂。
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8楼2013-11-27 16:02:19
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binqin

铁杆木虫 (职业作家)
我们实验室大多数时间都走正相，正己烷异丙醇最多，换相时用纯异丙醇小流速冲过夜。

[ 发自小木虫客户端 ]
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新的开始
10楼2013-11-28 22:35:37
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普通回帖

独恋伊人

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yjlrx at 2013-11-26 21:19:34
去掉C18柱，接上两通，异丙醇置换出甲醇，再换上正相柱，即可。

接上两通后，在把流动相甲醇换成异丙醇时是不要排气？ 然后把管路中的甲醇置换出来，再接安上正相柱？
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3楼2013-11-26 21:31:57
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独恋伊人

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wyy080214 at 2013-11-26 22:27:03
1、虽然使用正相柱，但是只能用异丙醇体系。
2、正己烷之类的溶剂不能使用，因为泵的设计是为反相的，用正相会损害到密封垫或者其他部位。

啊，这个我还真没注意过这个问题， 我打算用是异辛烷和二氧六环来做流动相做实验，那是不是也会出问题？
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7楼2013-11-27 10:25:59
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yjlrx

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by wyy080214 at 2013-11-27 16:02:19
异辛烷和二氧六环的具体性质我也不是很清楚，可以查查相关资料，但是有一点，就是不要使用纯粹的正相溶剂。...

应该可以，正相色谱柱的主旨是流动相的主体系的极性一定要小于柱子的极性，但有时为了洗脱的需要也会有乙醇的参与。
你说的纯粹的正相溶剂的确不行，能不能详细说点，请教一下~
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9楼2013-11-27 22:47:29
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