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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 色谱柱柱效降低应该如何补救呢？
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Elliza

金虫 (正式写手)

[求助] 色谱柱柱效降低应该如何补救呢？

我用的色谱柱是Waters的C18柱，4.6mm*100mm，粒径是3.5微米。我平时做实验用的流动相是乙腈和盐溶液。最近做实验时发现出的峰形不是很好看，有点儿变形。希望得到大家的帮助！谢谢！
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无论做什么，记得为自己而做，就会毫无怨言！
1楼 2011-07-18 17:37:36
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Elliza

金虫 (正式写手)
根据色谱柱使用说明，测得此色谱柱现在柱效大约为3900，而说明书给的柱效应为13900，柱效降低了将近10000，所以希望得到大家关于色谱柱柱效降低的相关补救措施！不胜感激！
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无论做什么，记得为自己而做，就会毫无怨言！
2楼2011-07-18 17:39:42
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fgy20045832

木虫 (正式写手)

致良知，知行合一

【答案】应助回帖

Elliza(金币+2): 好的，我用您给的方法试试吧！ 2011-07-18 19:20:29
柱效随着你使用时间的累积肯定会降低的，不过一般都是在5000以上就能接受。
你平时用缓冲盐和乙腈作流动相，估计是盐的残留多了，你可以再生一下
再生溶剂：蒸馏水←→甲醇（也可以使用异丙醇）最好是梯度冲洗
柱子的贮存：色谱柱用甲醇冲洗，柱子不能贮存在水或水性溶剂中。
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通往天堂的路，正在修葺中...
3楼2011-07-18 19:03:33
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yukepotato

金虫 (正式写手)

美猴王

【答案】应助回帖

Elliza(金币+1): 好的，您的建议我会试试的！ 2011-07-18 22:10:32
将进口端的柱头卸下来，超声试试有没有用！
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永远不要带着问题去找你的上司！
4楼2011-07-18 21:28:47
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xiao727

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

Elliza(金币+1): 好的，谢谢啦！ 2011-07-18 22:10:51
估计是柱头有盐析出，柱子遭污染了。用水-有机相梯度反复冲看看行不。C18柱使用缓冲盐后，可以先用低浓度有机相或纯化水冲洗，再慢慢过渡到高浓度有机相；使用前也可以先用低浓度有机相或水过渡一下
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一切都会好的
5楼2011-07-18 21:58:27
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songxj5277

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

柱效下降确实很多，如果时间用长了，一般冲洗再生方法效果不理想时可以考虑柱子反接，以新柱方法处理柱子后考查。
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6楼2011-07-19 09:40:14
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duanwei362

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

Elliza(金币+1): 谢谢！ 2011-07-20 14:43:40
1.长时间使用柱子柱效降低是必然的，建议查看实验记录柱效降低是突然性的还是长时间才造成的，如果是时间太长了应该难以救回了，如果是突然造成的，你要找到原因是因为使用别的一些物质还是使用不当造成的，如果是因为使用高盐相的物质，那就如前面的人所说的，按从低有机相（色谱甲醇和纯水）至高有机相梯度冲洗（可以冲洗1-3天），注意低有机相时水相千万别高于95%（有机相不能低于5%），那样会造成新的损害，如果是一些特殊物质具体是什么您可以自己查到，就要对症下药把那种物质用洗脱能力强的流动相冲洗出来就好了，注意别接检测器就是的。
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7楼2011-07-19 10:29:30
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linnachem

木虫 (小有名气)
我也遇到这样的问题，借楼主的地盘交流一下！
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8楼2011-07-19 11:03:36
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linnachem

木虫 (小有名气)
我之前曾用乙酸乙酯和异丙醇来冲洗，可是冲洗完以后压力比以前的高了好多，不知道是什么原因啊！很是郁闷1
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9楼2011-07-19 11:05:36
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shelly8059

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

理论塔板数降低原因是因为色谱峰变宽了，如果色谱柱的压力没有大的变化，拆柱筛板超声效果不大，建议，先用水相多的冲，再用有机相多的低流速过夜，第二天测一下柱效；效果不大的话，就反冲正用，实在不行那就反冲反用。
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海阔凭鱼跃，天高任鸟飞！
10楼2011-07-19 13:46:44
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