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Elliza

金虫 (正式写手)

[求助] 色谱柱柱效降低应该如何补救呢?

我用的色谱柱是Waters的C18柱,4.6mm*100mm,粒径是3.5微米。我平时做实验用的流动相是乙腈和盐溶液。最近做实验时发现出的峰形不是很好看,有点儿变形。希望得到大家的帮助!谢谢!
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无论做什么,记得为自己而做,就会毫无怨言!
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Elliza

金虫 (正式写手)

根据色谱柱使用说明,测得此色谱柱现在柱效大约为3900,而说明书给的柱效应为13900,柱效降低了将近10000,所以希望得到大家关于色谱柱柱效降低的相关补救措施!不胜感激!
无论做什么,记得为自己而做,就会毫无怨言!
2楼2011-07-18 17:39:42
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fgy20045832

木虫 (正式写手)

致良知,知行合一

【答案】应助回帖

Elliza(金币+2): 好的,我用您给的方法试试吧! 2011-07-18 19:20:29
柱效随着你使用时间的累积肯定会降低的,不过一般都是在5000以上就能接受。
你平时用缓冲盐和乙腈作流动相,估计是盐的残留多了,你可以再生一下
再生溶剂:蒸馏水←→甲醇(也可以使用异丙醇)最好是梯度冲洗
柱子的贮存:色谱柱用甲醇冲洗,柱子不能贮存在水或水性溶剂中。
通往天堂的路,正在修葺中...
3楼2011-07-18 19:03:33
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yukepotato

金虫 (正式写手)

美猴王

【答案】应助回帖

Elliza(金币+1): 好的,您的建议我会试试的! 2011-07-18 22:10:32
将进口端的柱头卸下来,超声试试有没有用!
永远不要带着问题去找你的上司!
4楼2011-07-18 21:28:47
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xiao727

铁虫 (初入文坛)

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Elliza(金币+1): 好的,谢谢啦! 2011-07-18 22:10:51
估计是柱头有盐析出,柱子遭污染了。用水-有机相梯度反复冲看看行不。C18柱使用缓冲盐后,可以先用低浓度有机相或纯化水冲洗,再慢慢过渡到高浓度有机相;使用前也可以先用低浓度有机相或水过渡一下
一切都会好的
5楼2011-07-18 21:58:27
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songxj5277

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

柱效下降确实很多,如果时间用长了,一般冲洗再生方法效果不理想时可以考虑柱子反接,以新柱方法处理柱子后考查。
6楼2011-07-19 09:40:14
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duanwei362

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

Elliza(金币+1): 谢谢! 2011-07-20 14:43:40
1.长时间使用柱子柱效降低是必然的,建议查看实验记录柱效降低是突然性的还是长时间才造成的,如果是时间太长了应该难以救回了,如果是突然造成的,你要找到原因是因为使用别的一些物质还是使用不当造成的,如果是因为使用高盐相的物质,那就如前面的人所说的,按从低有机相(色谱甲醇和纯水)至高有机相梯度冲洗(可以冲洗1-3天),注意低有机相时水相千万别高于95%(有机相不能低于5%),那样会造成新的损害,如果是一些特殊物质具体是什么您可以自己查到,就要对症下药把那种物质用洗脱能力强的流动相冲洗出来就好了,注意别接检测器就是的。
7楼2011-07-19 10:29:30
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linnachem

木虫 (小有名气)

我也遇到这样的问题,借楼主的地盘交流一下!
8楼2011-07-19 11:03:36
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linnachem

木虫 (小有名气)

我之前曾用乙酸乙酯和异丙醇来冲洗,可是冲洗完以后压力比以前的高了好多,不知道是什么原因啊!很是郁闷1
9楼2011-07-19 11:05:36
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shelly8059

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

理论塔板数降低原因是因为色谱峰变宽了,如果色谱柱的压力没有大的变化,拆柱筛板超声效果不大,建议,先用水相多的冲,再用有机相多的低流速过夜,第二天测一下柱效;效果不大的话,就反冲正用,实在不行那就反冲反用。
海阔凭鱼跃,天高任鸟飞!
10楼2011-07-19 13:46:44
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