| 查看: 3067 | 回复: 15 | |||
[交流]
【求助】求助正相柱的使用 已有3人参与
|
|||
|
我想用正相的制备柱分化合物（样品极性低，甲醇不溶，无法用反向柱），但以前没用过，身边的的人也没用过，所以特来请教用过的人， 用之前怎么处理，用正己烷冲柱吗？ 一般要平衡多长时间？ 用完以后用什么冲柱子？ 谢谢  |
回复此楼» 猜你喜欢
0855求调剂材料
已经有12人回复
-
297分083200求助
已经有7人回复
-
070300化学学硕311分求调剂
已经有10人回复
-
专硕0854初试考材科基，求调剂
已经有8人回复
-
0857大类环境工程B区求调剂
已经有3人回复
-
0817化学工程与技术求调剂，一志愿中海洋319
已经有14人回复
-
0703化学调剂325分
已经有11人回复
-
286求调剂
已经有8人回复
-
求调剂
已经有5人回复
-
生物学308分求调剂（一志愿华东师大）
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 正相手性柱分离手性化合物
已经有20人回复
- 原反相C18色谱柱如何更换成正相硅胶色谱柱，要注意那些问题
已经有10人回复
- 求助：硅胶色谱柱的使用
已经有10人回复
- 求助 正相硅胶柱可否用水相溶剂进样？
已经有3人回复
- 做过正相色谱的高手进
已经有14人回复
- HPLC正相色谱柱怎么选择
已经有10人回复
- 正相色谱柱都能用来分析什么物质呢
已经有6人回复
- 正相色谱硅胶柱流动相
已经有13人回复
- 正相柱与反相柱的洗脱顺序
已经有6人回复
- 大赛璐手性柱 正相
已经有8人回复
- 正相柱的流动相一般用什么？
已经有21人回复
- 【求助】正相柱与反相柱
已经有8人回复
- 【求助】新换上的以硅胶为填充剂的正相色谱柱如何洗脱！？
已经有5人回复
- 【求助】正相硅胶柱的问题
已经有5人回复
- 【求助】聚酰胺柱子分离黄酮时作为正相柱还是反相柱来过？
已经有4人回复
- 【求助】正相柱子怎么再生？怎么去水？
已经有12人回复
- 【求助】HPLC分离小极性物质，用正相柱还是反相柱？
已经有19人回复
- 【求助】正相硅胶柱子保存？
已经有7人回复
- 【求助】正相色谱柱使用问题
已经有16人回复
leiopixie
木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 贵宾: 0.22
- 金币: 4599.8
- 帖子: 274
- 在线: 7.7小时
- 虫号: 223599
- 注册: 2006-03-21
- 性别: MM
- 专业: 微生物学
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
opq691(金币+5,VIP+0):很详细哈 ，感谢交流 欢迎常来 1-21 20:21
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
opq691(金币+5,VIP+0):很详细哈 ，感谢交流 欢迎常来 1-21 20:21
|
首先，关于色谱柱的选择问题： “样品极性低，甲醇不溶”，不能只因这一特点就选择正相系统。有些样品的溶解度不只是与极性有关，溶解度的影响因素很复杂，因此先要需要了解清楚样品在什么溶剂里溶解性质好，什么溶剂里不溶，要多尝试一些溶剂，也要又一个浓度说明。对于极性低的概念也应该给予数据说明，用什么TLC条件Rf多少？这些才是指导你选择合适分离体系的依据。 其次，关于色谱柱的养护问题： 正相色谱柱一般来说都比较娇气，使用条件较大多反相色谱柱来说都要苛刻一些，尤其是大部分正相色谱柱都非常怕水！PH也有一定的限制。必须指出的是所有的色谱柱都有使用说明，里面会有色谱柱使用的条件要求以及养护方法。仔细阅读使用说明至关重要，将直接影响到分离度、柱效、重现性、寿命等参数！建议楼主不要冒然下手，要做好充分的理论准备，否则柱子很快就会牺牲。 |
8楼2010-01-21 20:05:11
9楼2010-02-09 14:23:30
shooseal
木虫 (著名写手)
- 应助: 82 (初中生)
- 金币: 3204.4
- 散金: 868
- 红花: 22
- 沙发: 1
- 帖子: 1416
- 在线: 323.8小时
- 虫号: 762466
- 注册: 2009-05-04
- 性别: GG
- 专业: 中药学其他科学问题
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
opq691(金币+5):感谢参与讨论，欢迎常来专家版交流 2010-03-03 12:47
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
opq691(金币+5):感谢参与讨论，欢迎常来专家版交流 2010-03-03 12:47
|
正相的柱子除了不能用水外，也不能用甲醇、乙腈和THF（应为这些都是反相中的流动相组成）。 正相流动相的主要组成是正己烷和异丙醇（比例适当调整），在这基础上可以适当添加三氟醋酸、冰醋酸或二甲胺（比例一般都在0.1%左右），添加的这些我认为主要等同于反相中缓冲盐的作用。 还有就是稀释液（Diluent），一般同流动相一样，不过有些情况，如不好溶解时可以适当调整比例，可以用作正相稀释的我只碰到过正己烷，异丙醇和乙醇这三种物质。 还有就是柱子的保养，正相柱一般价格比较昂贵，所以保养尤其要注意，我一般用正己烷-异丙醇（90：10）来清洗和保存，如果柱效变差，可以考虑用纯的异丙醇在低流速的情况下活化多个小时（4-10h），可能会提高柱效的 建议所用试剂都选用HPLC级的（HPLC级的没必要照4楼的建议做，基本没影响） （强烈建议仔细查看说明书，很有用的。） 另外楼主如果上反相只是样品不好溶解的话，那么可以考虑换一下稀释液啊，水、甲醇、乙腈、THF这几种有选择的搭配一下就好了啊，实在不行可以稍微加一些NaOH溶液啊（如10ml中加10ulNaOH是可以的，只要有空白对照就OK了） 以上见解如有错漏，还请见谅 |
10楼2010-02-20 21:14:07
7楼2010-01-13 14:35:16
naren4545
木虫 (正式写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 贵宾: 0.05
- 金币: 2307.9
- 红花: 1
- 帖子: 703
- 在线: 64.3小时
- 虫号: 438965
- 注册: 2007-10-04
- 性别: GG
- 专业: 药物分析
2楼2009-11-22 15:59:45
3楼2009-11-22 19:53:06
akosrios
铁杆木虫 (知名作家)
- ACI: 1
- 应助: 365 (硕士)
- 贵宾: 0.255
- 金币: 7418.4
- 散金: 460
- 红花: 12
- 沙发: 39
- 帖子: 8208
- 在线: 855.1小时
- 虫号: 848063
- 注册: 2009-09-15
- 性别: GG
- 专业: 色谱分析
4楼2009-11-23 08:09:56
tangfm08
木虫 (著名写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 4206.5
- 散金: 2752
- 红花: 3
- 帖子: 1562
- 在线: 77.4小时
- 虫号: 606299
- 注册: 2008-09-18
- 性别: MM
- 专业: 色谱分析
5楼2009-11-23 08:13:25
6楼2009-11-23 10:05:57
