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泼皮阿三

银虫 (小有名气)

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[交流] 【求助】求助正相柱的使用已有3人参与

我想用正相的制备柱分化合物（样品极性低，甲醇不溶，无法用反向柱），但以前没用过，身边的的人也没用过，所以特来请教用过的人，

用之前怎么处理，用正己烷冲柱吗？
一般要平衡多长时间？
用完以后用什么冲柱子？

谢谢

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1楼2009-11-22 13:31:45

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shooseal

木虫 (著名写手)

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
opq691(金币+5):感谢参与讨论，欢迎常来专家版交流 2010-03-03 12:47

正相的柱子除了不能用水外，也不能用甲醇、乙腈和THF（应为这些都是反相中的流动相组成）。
正相流动相的主要组成是正己烷和异丙醇（比例适当调整），在这基础上可以适当添加三氟醋酸、冰醋酸或二甲胺（比例一般都在0.1%左右），添加的这些我认为主要等同于反相中缓冲盐的作用。
还有就是稀释液（Diluent），一般同流动相一样，不过有些情况，如不好溶解时可以适当调整比例，可以用作正相稀释的我只碰到过正己烷，异丙醇和乙醇这三种物质。
还有就是柱子的保养，正相柱一般价格比较昂贵，所以保养尤其要注意，我一般用正己烷-异丙醇（90：10）来清洗和保存，如果柱效变差，可以考虑用纯的异丙醇在低流速的情况下活化多个小时（4-10h），可能会提高柱效的
建议所用试剂都选用HPLC级的（HPLC级的没必要照4楼的建议做，基本没影响）
（强烈建议仔细查看说明书，很有用的。）
另外楼主如果上反相只是样品不好溶解的话，那么可以考虑换一下稀释液啊，水、甲醇、乙腈、THF这几种有选择的搭配一下就好了啊，实在不行可以稍微加一些NaOH溶液啊（如10ml中加10ulNaOH是可以的，只要有空白对照就OK了）
以上见解如有错漏，还请见谅