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kuloxbin

禁虫 (正式写手)

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gwmgyp

版主 (知名作家)



kuloxbin(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by kuloxbin at 2011-05-30 22:53:06:
正相柱的流动相一般用什么?
怎样选择分析的样品该用正相柱还是反相柱?

正相柱的流动相一般用正己烷和异丙醇,调节剂一般用二乙胺或者三氟乙酸之类的;如果样品在反相柱上用缓冲盐比例达到90%以上还是达不到合适的保留和分离度时,就该考虑用正相柱了。
2楼2011-05-31 07:50:37
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fgy20045832

木虫 (正式写手)


★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
novus(金币+1): 多谢指教,欢迎常来药学版! 2011-05-31 19:36:08
引用回帖:
Originally posted by gwmgyp at 2011-05-31 07:50:37:
正相柱的流动相一般用正己烷和异丙醇,调节剂一般用二乙胺或者三氟乙酸之类的;如果样品在反相柱上用缓冲盐比例达到90%以上还是达不到合适的保留和分离度时,就该考虑用正相柱了。

首先你要明白正相与反相的的区别,如果采用极性固定相和相对非极性流动相,就称为正相;如果采用相对非极性固定相和极性流动相,则称为反相;
然后选择流动相就有依据了,同意楼上观点,补充说明,你可以通过分析你样品或者是需要分离杂质的极性大小,然后选择合适的HPLC,正相流动相不要有水,坏柱子..
3楼2011-05-31 08:20:25
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muchang

金虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
分析你的样品,一般极性小的用正相柱的较多,但是要看薄层板摸条件的情况。正相柱一般用石油醚,乙酸乙酯,丙酮,氯仿,甲醇对等的其中两相搭配用,石油醚-乙酸乙酯,氯仿-甲醇搭配的较多。Studying……
4楼2011-05-31 08:35:04
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bluesky1986

银虫 (初入文坛)


★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
novus(金币+1): 谢谢交流,欢迎常来药学版! 2011-05-31 19:36:32
正相可以用正己烷,异丙醇,乙醇,二氯甲烷等,正己烷的极性最小,乙醇比异丙醇的极性大些,摸条件时可以用正己烷和乙醇搭配
5楼2011-05-31 10:45:19
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kuloxbin

禁虫 (正式写手)

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6楼2011-05-31 11:21:52
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kuloxbin

禁虫 (正式写手)

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7楼2011-05-31 11:36:16
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kuloxbin

禁虫 (正式写手)

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8楼2011-05-31 11:50:11
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muchang

金虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
与乙腈搭配的这几个我都没用过。一般经典一点的搭配是石油醚-乙酸乙酯,石油醚-丙酮,二氯甲烷-甲醇,二氯甲烷-丙酮,氯仿-丙酮,至于比例,就要看你的样品在薄层板上的情况了。你摸条件看看就能确定比例了。
9楼2011-06-01 09:39:29
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secjade

铜虫 (初入文坛)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
我们一般用异丙醇和正己烷作正相
10楼2011-06-01 10:53:50
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★ ★
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karl2100(金币+1): 多谢指教! 2011-06-01 19:01:35
一般从极性小的开始啊
我冲硅胶的时候,一开始是石油醚 然后乙酸乙酯和石油醚混合的。。。
你可以用几种混合比例,然后通过TLC 来判断,使用溶剂的情况。。。
11楼2011-06-01 11:11:26
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理想1981

铁虫 (初入文坛)


★ ★
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karl2100(金币+1): 多谢提供! 2011-06-01 19:01:51
正相柱可以用的流动相可以是烷烃类,二,三氯甲烷,二乙,醇类等比较多,要通过薄层层析来判断具体用哪种或哪几种流动相,而反相柱一般就是用醇类了,两种柱子之间不选择不冲突,不能通过目标极性的大小来选择柱子,如果能用正相则首选正相,而反相柱对一些极性和机构类似的有机物分离能力较强,要去动手试,这个没有很具体的规则,希望对你有帮助
12楼2011-06-01 11:12:12
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linhl666

银虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
Originally posted by 粉色玉米 at 2011-06-01 11:11:26:
一般从极性小的开始啊
我冲硅胶的时候,一开始是石油醚 然后乙酸乙酯和石油醚混合的。。。
你可以用几种混合比例,然后通过TLC 来判断,使用溶剂的情况。。。

同意楼上的观点,先用TLC初步分离确定流动相成分和大概的比例,然后再用HPLC微调,其他的就好办了。
13楼2011-06-01 17:16:44
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kuloxbin

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14楼2011-06-01 21:37:50
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理想1981

铁虫 (初入文坛)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
看荧光应该可以的,你不是分段么,怎么还有杂质一说啊
15楼2011-06-01 21:56:18
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理想1981

铁虫 (初入文坛)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
试试用石油醚:丙酮10:1,如果杂质极性很小的话,这个比例出去它还是很好的
16楼2011-06-01 22:13:16
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理想1981

铁虫 (初入文坛)


如果实验室有葡聚糖凝胶的话,按你说的他们分子量相差这么大,用葡聚糖很容易分开
17楼2011-06-01 22:14:48
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ymw520

铁杆木虫 (著名写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
样品怕水的话一般就不用反相,极性太小也不好用反相
18楼2011-06-02 06:36:11
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kuloxbin

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19楼2011-06-02 15:36:51
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理想1981

铁虫 (初入文坛)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
没有全明白你的意思,荧光强度和含量没有太大关系,我意思是你先用薄层看一下,摸个合适的体系,比如石油醚:氯仿5:1或者石油醚:二乙10:1等,看看杂质能不能看到,这样的体系大分子量的聚合物板子上不会起来
20楼2011-06-02 15:53:57
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kuloxbin

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21楼2011-06-03 10:04:55
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xxfan

金虫 (著名写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by muchang at 2011-05-31 08:35:04
分析你的样品,一般极性小的用正相柱的较多,但是要看薄层板摸条件的情况。正相柱一般用石油醚,乙酸乙酯,丙酮,氯仿,甲醇对等的其中两相搭配用,石油醚-乙酸乙酯,氯仿-甲醇搭配的较多。Studying……

你好 氯仿和甲醇作为正相柱(裸露的硅胶柱)的流动相 可以不?
22楼2013-05-15 19:11:13
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