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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 正相柱的流动相一般用什么？
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kuloxbin

禁虫 (正式写手)
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1楼 2011-05-30 22:53:06
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gwmgyp

版主 (知名作家)
★
kuloxbin(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by kuloxbin at 2011-05-30 22:53:06:
正相柱的流动相一般用什么？
怎样选择分析的样品该用正相柱还是反相柱？

正相柱的流动相一般用正己烷和异丙醇，调节剂一般用二乙胺或者三氟乙酸之类的；如果样品在反相柱上用缓冲盐比例达到90%以上还是达不到合适的保留和分离度时，就该考虑用正相柱了。
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2楼2011-05-31 07:50:37
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fgy20045832

木虫 (正式写手)
★ ★
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novus(金币+1): 多谢指教，欢迎常来药学版！ 2011-05-31 19:36:08
引用回帖:
Originally posted by gwmgyp at 2011-05-31 07:50:37:
正相柱的流动相一般用正己烷和异丙醇，调节剂一般用二乙胺或者三氟乙酸之类的；如果样品在反相柱上用缓冲盐比例达到90%以上还是达不到合适的保留和分离度时，就该考虑用正相柱了。

首先你要明白正相与反相的的区别，如果采用极性固定相和相对非极性流动相，就称为正相;如果采用相对非极性固定相和极性流动相，则称为反相；
然后选择流动相就有依据了，同意楼上观点，补充说明，你可以通过分析你样品或者是需要分离杂质的极性大小，然后选择合适的HPLC，正相流动相不要有水，坏柱子..
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3楼2011-05-31 08:20:25
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muchang

金虫 (小有名气)
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分析你的样品，一般极性小的用正相柱的较多，但是要看薄层板摸条件的情况。正相柱一般用石油醚，乙酸乙酯，丙酮，氯仿，甲醇对等的其中两相搭配用，石油醚-乙酸乙酯，氯仿-甲醇搭配的较多。Studying……
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4楼2011-05-31 08:35:04
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bluesky1986

银虫 (初入文坛)
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novus(金币+1): 谢谢交流，欢迎常来药学版！ 2011-05-31 19:36:32
正相可以用正己烷，异丙醇，乙醇，二氯甲烷等，正己烷的极性最小，乙醇比异丙醇的极性大些，摸条件时可以用正己烷和乙醇搭配
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5楼2011-05-31 10:45:19
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kuloxbin

禁虫 (正式写手)
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6楼2011-05-31 11:21:52
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kuloxbin

禁虫 (正式写手)
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7楼2011-05-31 11:36:16
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kuloxbin

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8楼2011-05-31 11:50:11
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muchang

金虫 (小有名气)
★
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与乙腈搭配的这几个我都没用过。一般经典一点的搭配是石油醚-乙酸乙酯，石油醚-丙酮，二氯甲烷-甲醇，二氯甲烷-丙酮，氯仿-丙酮，至于比例，就要看你的样品在薄层板上的情况了。你摸条件看看就能确定比例了。
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9楼2011-06-01 09:39:29
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secjade

铜虫 (初入文坛)
★
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我们一般用异丙醇和正己烷作正相
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10楼2011-06-01 10:53:50
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粉色玉米

木虫 (著名写手)
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karl2100(金币+1): 多谢指教！ 2011-06-01 19:01:35
一般从极性小的开始啊
我冲硅胶的时候，一开始是石油醚 然后乙酸乙酯和石油醚混合的。。。
你可以用几种混合比例，然后通过TLC 来判断，使用溶剂的情况。。。
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11楼2011-06-01 11:11:26
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理想1981

铁虫 (初入文坛)
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karl2100(金币+1): 多谢提供！ 2011-06-01 19:01:51
正相柱可以用的流动相可以是烷烃类，二，三氯甲烷，二乙，醇类等比较多，要通过薄层层析来判断具体用哪种或哪几种流动相，而反相柱一般就是用醇类了，两种柱子之间不选择不冲突，不能通过目标极性的大小来选择柱子，如果能用正相则首选正相，而反相柱对一些极性和机构类似的有机物分离能力较强，要去动手试，这个没有很具体的规则，希望对你有帮助
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12楼2011-06-01 11:12:12
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linhl666

银虫 (小有名气)
★
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Originally posted by 粉色玉米 at 2011-06-01 11:11:26:
一般从极性小的开始啊
我冲硅胶的时候，一开始是石油醚 然后乙酸乙酯和石油醚混合的。。。
你可以用几种混合比例，然后通过TLC 来判断，使用溶剂的情况。。。

同意楼上的观点，先用TLC初步分离确定流动相成分和大概的比例，然后再用HPLC微调，其他的就好办了。
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13楼2011-06-01 17:16:44
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kuloxbin

禁虫 (正式写手)
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14楼2011-06-01 21:37:50
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理想1981

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
看荧光应该可以的，你不是分段么，怎么还有杂质一说啊
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15楼2011-06-01 21:56:18
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理想1981

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
试试用石油醚：丙酮10:1，如果杂质极性很小的话，这个比例出去它还是很好的
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16楼2011-06-01 22:13:16
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理想1981

铁虫 (初入文坛)
如果实验室有葡聚糖凝胶的话，按你说的他们分子量相差这么大，用葡聚糖很容易分开
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17楼2011-06-01 22:14:48
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ymw520

铁杆木虫 (著名写手)
★
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样品怕水的话一般就不用反相，极性太小也不好用反相
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18楼2011-06-02 06:36:11
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kuloxbin

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19楼2011-06-02 15:36:51
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理想1981

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
没有全明白你的意思，荧光强度和含量没有太大关系，我意思是你先用薄层看一下，摸个合适的体系，比如石油醚：氯仿5:1或者石油醚：二乙10:1等，看看杂质能不能看到，这样的体系大分子量的聚合物板子上不会起来
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20楼2011-06-02 15:53:57
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kuloxbin

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21楼2011-06-03 10:04:55
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xxfan

金虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by muchang at 2011-05-31 08:35:04
分析你的样品，一般极性小的用正相柱的较多，但是要看薄层板摸条件的情况。正相柱一般用石油醚，乙酸乙酯，丙酮，氯仿，甲醇对等的其中两相搭配用，石油醚-乙酸乙酯，氯仿-甲醇搭配的较多。Studying……

你好 氯仿和甲醇作为正相柱（裸露的硅胶柱）的流动相 可以不？
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22楼2013-05-15 19:11:13
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