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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 正相柱与反相柱的洗脱顺序
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TLC菜鸟

金虫 (正式写手)

[求助] 正相柱与反相柱的洗脱顺序

因基础知识不扎实，对正相柱与反相柱的洗脱顺序十分不解，求高手指教。。
   使用时为了能够让组分依次洗脱出来，梯度洗脱流动相的极性是应该怎么变化，水和有机相的比例应该是怎么变化，原理是什么呀？
  真希望各位大哥大姐能够帮帮我，谢谢，真的谢谢。

[ 来自科研家族 药物制剂 ]

[ Last edited by TLC菜鸟 on 2011-11-15 at 21:32 ]
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只为活个问心无愧。。
1楼2011-11-15 21:23:25
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

TLC菜鸟(金币+2): 我清楚是差速迁移，我想了解的是，这个差速迁移的原因是什么，比如分子间的作用力 2011-11-15 23:40:48
梯度洗脱，差速迁移。
梯度：调节流动相比例，达到调节极性目的，引起分子差速洗脱。
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守候在风中的宁静。
3楼2011-11-15 22:41:32
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wanggch123

荣誉版主 (文坛精英)

王版

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

这个建议去图书馆找本分离的书

否则一句两句也说不明白的。
赞一下 回复此楼
努力奋斗，人生终将辉煌！
2楼2011-11-15 22:32:24
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豆哥

主管区长 (职业作家)

制粒能手

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
novus(金币+1): 谢谢交流！ 2011-11-16 21:19:50
TLC菜鸟(金币+5): 为什么反相柱的洗脱顺序极性大的先出来呢？是什么原理呀 2011-11-18 18:49:47
1. 正相柱洗脱的时候组分是按照极性从小到大的顺序洗脱下来的，洗脱剂（如甲醇、乙腈、正己烷等）极性从小到大，常用填料为硅胶等；
反相柱洗脱的时候组分是按照极性从大到小的顺序洗脱的，洗脱剂（如甲醇-水）性从大到小选择，常用的填料有ODS等。
2. 差速迁移机制，分配色谱（分配系数）、吸附色谱（物理吸附）、离子交换色谱（离子交换）、空间排阻色谱（分子大小）各有不同。
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边学边问，才有学问。
4楼2011-11-16 11:36:26
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春江花都

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-11-20 10:53:06
正相系统换反相系统注意事项


  
        在液相色谱仪使用过程中，我们经常遇到液相色谱仪用户正反相色谱系统互相现象，但由于使用操作不当，常常不注意间损坏了色谱柱，同时加重了液相色谱系统的污染，导致分析工作出现麻烦，现在将置换工作的基本流程列出，供用户参考：

1. 首先用正己烷(硅胶柱)将色谱系统包括正相柱平衡好(保证20分钟内基线平直,无峰出现)；

2. 卸掉硅胶柱，封好保存；

3. 将进样阀与检测器短路，用异丙醇冲洗色谱系统10分钟(流速1ml/min).在这期间空拨进样阀三次；

4.换甲醇(或已睛)冲洗系统20分钟(流速2ml/min) ，此期间空拨进样阀三次；

5. 安上反相色谱柱， 流速调到1ml/min,用甲醇(或已睛)冲洗系统，直到系统平衡；

6.进三针标准品,检验面积 ﹑保留时间是否重复,若不重复,继续冲洗直到重复。


反相系统换正相系统的注意事项



                           反相系统换正相系统的注意事项
1.首先用甲醇(或已腈)将色谱系统包括反相柱平衡好(保证20分钟内基线平直,无峰出现)；
2.卸掉反相柱，封好保存；
3.将进样阀与检测器短路,用异丙醇冲洗色谱系统10分钟(流速1ml/min)，在这期间空拨进样阀三次；
4.换正己烷(硅胶柱)冲洗系统20分钟(流速2ml/min) ， 此期间空拨进样阀三次；
5.安上硅胶色谱柱， 流速调到1ml/min,用正己烷冲洗系统，直到系统平衡；
6.进三针标准品检验面积﹑保留时间是否重复,若不重复,继续冲洗直到重复。
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5楼2011-11-19 22:38:14
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