应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 反相C18柱分离多巴胺，柱子用一段时间后柱压很大，怎么解决
211/3返回列表123下一页
查看: 2637  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

落叶沙沙

金虫 (初入文坛)

[求助] 反相C18柱分离多巴胺，柱子用一段时间后柱压很大，怎么解决

分离多巴胺，使用安捷伦C18柱，流动相是水相：有机相=7:3，水相为NaH2PO4  50mmol/L, EDTA  250mg/L, 十二烷基硫酸钠 500mg/L; 有机相为乙腈 200ml/L, 甲醇 100ml/L. 磷酸调pH2.9, 流速1.0ml/min. 刚开始每次用完用100%甲醇冲洗柱子。柱子使用过一段时间后，柱压变高，已经超过机子最大压力限制，用甲醇冲仍不减小，没有办法使用。现在改用不含SDS的同组分流动相冲洗20倍柱体积，水：甲醇+乙腈=7:3冲20倍柱体积，100%甲醇冲20倍柱体积，但压力仍不减小，怎么办？在网上查过，说用小流速反冲，但是商品柱能反冲吗，有没有影响，冲完还能不能用？求高人指点。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-03-15 17:32:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

lanpishu23

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你用完直接用100%甲醇冲，肯定很多盐析出来了，堵住柱子了，应该做完样用小流速甲醇：水=1:9冲过夜，出去盐。
赞一下(2人) 回复此楼
没有最好，只有更好
4楼2012-03-15 19:09:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhrmghgmn

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
落叶沙沙: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-03-20 08:58:00
支持四楼的观点，有反冲盐的流动相，关机前必须用甲醇+水=10+90的溶剂（水的比例还可以加大）冲洗，把系统中盐类物质全部冲洗掉，再用纯甲醇冲洗。依你目前色谱柱的状况，你用甲醇+水=10+90的溶剂（水的比例还可以加大或全部用水）冲洗试试看，应该会有改善，把色谱柱反过来冲与不反过来冲效果基本是一样的，色谱柱尽量不要反接。
赞一下(2人) 回复此楼
10楼2012-03-16 08:00:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以反冲的，但是时间不能太长，对柱效有一定的影响。不过，我觉得就是反冲也不一定能冲出来了，还是考虑换柱子吧，肯定是以前的缓冲盐没有冲洗干净，越积越多，这些缓冲盐如果当时没有冲干净，以后费再大的力气都难冲下来了。
赞一下 回复此楼
2楼2012-03-15 18:45:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

偶尔间抖擞
3楼2012-03-15 18:59:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

落叶沙沙

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lanpishu23 at 2012-03-15 19:09:02:
你用完直接用100%甲醇冲，肯定很多盐析出来了，堵住柱子了，应该做完样用小流速甲醇：水=1:9冲过夜，出去盐。

那现在用小流速甲醇：水=1:9冲过夜，还能把盐冲出来吗？这个柱子还有没有救呀？
赞一下 回复此楼
5楼2012-03-15 21:08:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

落叶沙沙

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lihuan0525 at 2012-03-15 18:45:29:
可以反冲的，但是时间不能太长，对柱效有一定的影响。不过，我觉得就是反冲也不一定能冲出来了，还是考虑换柱子吧，肯定是以前的缓冲盐没有冲洗干净，越积越多，这些缓冲盐如果当时没有冲干净，以后费再大的力气都 ...

那怎么办呀，现在如果用甲醇+水冲过夜，缓冲盐能冲掉么，这跟柱子是不是就报废了呀？
赞一下 回复此楼
6楼2012-03-15 21:10:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
每次用完用100%甲醇冲洗柱子——操作有问题，应该先用大比例的水冲洗，以免缓冲盐析出。现在也只能先用90%左右的水冲洗，把盐洗出来了。
赞一下 回复此楼
守候在风中的宁静。
7楼2012-03-15 21:30:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lfgang2005

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的流动相有盐类的缓冲，所以每次用完先用水冲洗柱子，才行。应该先用大比例的水冲洗，以免缓冲盐析出。现在也只能先用 水冲洗，把盐洗出来了。
赞一下 回复此楼
分析测试中心★ＱＱ729097302 全场八折！气质、红/紫外、元素分析、粉末衍射、电镜、热重等欢迎大家的光临。
8楼2012-03-15 21:54:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 落叶沙沙 at 2012-03-15 21:10:03:
那怎么办呀，现在如果用甲醇+水冲过夜，缓冲盐能冲掉么，这跟柱子是不是就报废了呀？

只能说试试吧，祝你好运
赞一下 回复此楼
9楼2012-03-15 23:30:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 落叶沙沙 的主题更新
211/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 化学工程321分求调剂 +5 大米饭！ 2026-03-15 5/250 2026-03-15 18:49 by a不易
[考研] 材料与化工 323 英一+数二+物化，一志愿：哈工大 本人本科双一流 +4 自由的_飞翔 2026-03-13 5/250 2026-03-14 19:39 by hmn_wj
[基金申请] 面上和青基一样限30页不合理 +5 wowsunflower 2026-03-10 7/350 2026-03-14 17:21 by kingkocxr
[考研] 211本，11408一志愿中科院277分，曾在中科院自动化所实习 +3 Losir 2026-03-12 3/150 2026-03-14 12:11 by 热情沙漠
[考研] 085600材料与化工 326 求调剂 +5 热爱生活ing 2026-03-09 5/250 2026-03-14 02:39 by JourneyLucky
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-09 3/150 2026-03-14 01:57 by JourneyLucky
[考研] 307求调剂 +7 超级伊昂大王 2026-03-10 7/350 2026-03-14 00:49 by JourneyLucky
[考研] 0856材料与化工309分求调剂 +6 ZyZy…… 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:38 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:30 by JourneyLucky
[考研] 【考研调剂求收留】 +3 Ceciilia 2026-03-11 3/150 2026-03-13 20:18 by JourneyLucky
[考研] 求b区学校调剂 +3 周56 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:20 by JourneyLucky
[考研] 282分材料专业求调剂院校 +18 枫桥ZL 2026-03-09 25/1250 2026-03-13 10:47 by 白夜悠长
[考研] 08食品或轻工求调剂，本科发表3篇sci一区top论文，一志愿南师大食品科学与工程 +3 我是一个兵， 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:21 by Yuyi.
[考研] 290求调剂 +3 ADT 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:19 by peike
[考研] 纺织、生物、化学、材料相关专业招生了 +4 耶耶业 2026-03-09 7/350 2026-03-12 19:05 by Equinoxhua
[考研] 420求调剂 +4 莫向外求11 2026-03-10 6/300 2026-03-12 14:41 by ruiyingmiao
[考研] 研究生招生 +3 徐海涛11 2026-03-10 7/350 2026-03-12 14:26 by 徐海涛11
[考研] 279求调剂 +3 莫xiao 2026-03-10 4/200 2026-03-11 08:06 by 斩魂滴兔子！
[考研] 327分求调剂086 +4 西红柿?小帅 2026-03-09 7/350 2026-03-10 14:47 by ruiyingmiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭