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【求助】反相C18层析柱怎样装柱,使用的问题
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各位虫友:我准备使用C18反相填料柱层析分离,但不知道怎样处理填料,装柱,上样和洗脱,使用普通玻璃柱是否可行,求大侠帮助一下哈?越详细越好,多谢多谢啦 洗脱时可以用水直接冲吗?谢谢大家啦 |
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rainbowseer
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2楼2011-09-16 14:06:29
syhorchid
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3楼2011-09-16 14:10:11
4楼2011-09-16 15:58:50
【答案】应助回帖
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qinhy(金币+1, PhEPI+1): 多谢回帖~ 2011-09-18 20:52:29
qinhy(金币+1, PhEPI+1): 多谢回帖~ 2011-09-18 20:52:29
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一. 操作步骤: 用反相板点板确定洗脱比例(必要的时候用梯度洗脱) 样品过滤 甲醇冲洗柱子 用水冲洗柱子 用尽量少的溶剂溶解样品,上样. 用已经确定好的洗脱剂洗脱 甲醇冲洗柱子 二 注意事项: 1. 一般只用“甲醇-水”系统 2. 梯度洗脱时一定要从极性大的逐步换到小极性的溶剂. 3. 不要让柱子干掉,要让其完全浸泡在溶剂之中。 3. 溶剂极性转换时跨度不宜过大,以免放热产生气泡. 4. 反相柱的装填一般用甲醇装柱,有条件的话可以尽可能的在高流速下压一下柱床,这样柱效好一些。 |

5楼2011-09-18 19:53:26
comeonkarry
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6楼2011-09-18 20:32:11
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