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【求助】反相C18层析柱怎样装柱，使用的问题
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各位虫友：我准备使用C18反相填料柱层析分离，但不知道怎样处理填料，装柱，上样和洗脱，使用普通玻璃柱是否可行，求大侠帮助一下哈？越详细越好，多谢多谢啦 洗脱时可以用水直接冲吗？谢谢大家啦 |
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 天然产物化学 |
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4楼2011-09-16 15:58:50
rainbowseer
铁虫 (著名写手)
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2楼2011-09-16 14:06:29
syhorchid
木虫之王 (文学泰斗)
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- 专业: 生物化学
3楼2011-09-16 14:10:11
【答案】应助回帖
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qinhy(金币+1, PhEPI+1): 多谢回帖~ 2011-09-18 20:52:29
qinhy(金币+1, PhEPI+1): 多谢回帖~ 2011-09-18 20:52:29
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一. 操作步骤： 用反相板点板确定洗脱比例（必要的时候用梯度洗脱） 样品过滤 甲醇冲洗柱子 用水冲洗柱子 用尽量少的溶剂溶解样品，上样. 用已经确定好的洗脱剂洗脱 甲醇冲洗柱子 二 注意事项： 1. 一般只用“甲醇-水”系统 2. 梯度洗脱时一定要从极性大的逐步换到小极性的溶剂. 3. 不要让柱子干掉，要让其完全浸泡在溶剂之中。 3. 溶剂极性转换时跨度不宜过大，以免放热产生气泡. 4. 反相柱的装填一般用甲醇装柱，有条件的话可以尽可能的在高流速下压一下柱床，这样柱效好一些。 |
5楼2011-09-18 19:53:26
