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落叶沙沙

金虫 (初入文坛)

[求助] 反相C18柱分离多巴胺,柱子用一段时间后柱压很大,怎么解决

分离多巴胺,使用安捷伦C18柱,流动相是水相:有机相=7:3,水相为NaH2PO4  50mmol/L, EDTA  250mg/L, 十二烷基硫酸钠 500mg/L; 有机相为乙腈 200ml/L, 甲醇 100ml/L. 磷酸调pH2.9, 流速1.0ml/min. 刚开始每次用完用100%甲醇冲洗柱子。柱子使用过一段时间后,柱压变高,已经超过机子最大压力限制,用甲醇冲仍不减小,没有办法使用。现在改用不含SDS的同组分流动相冲洗20倍柱体积,水:甲醇+乙腈=7:3冲20倍柱体积,100%甲醇冲20倍柱体积,但压力仍不减小,怎么办?在网上查过,说用小流速反冲,但是商品柱能反冲吗,有没有影响,冲完还能不能用?求高人指点。
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lanpishu23

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你用完直接用100%甲醇冲,肯定很多盐析出来了,堵住柱子了,应该做完样用小流速甲醇:水=1:9冲过夜,出去盐。
没有最好,只有更好
4楼2012-03-15 19:09:02
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lanpishu23

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 偶尔间抖擞 at 2012-03-15 18:59:38:

这个不知道,现在具体什么原因也不知道,你先试试,应该是可以的恢复的!
没有最好,只有更好
14楼2012-03-17 14:46:47
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