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没有ODS反向板,怎么摸条件上ODS柱,求高人解答
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qhyy
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没有ODS反向板,怎么摸条件上ODS柱,求高人解答
最近在分极性大的组分,想用ODS柱,但苦于没有反向板指导柱洗脱,不知依什么样的条件合适,不知各位虫友在遇到这种情况时怎么处理?
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1楼
2012-02-17 21:17:47
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lihongjie326
at 2012-02-17 23:24:01:
可以用走高效液相的情况来确定,我就是这样做的效果挺好的,把能分开的那个区间的条件在细分一下,用低于那个条件的甲醇水条件来做起始的洗脱条件。
多谢交流,不过这样耗的时间很挺多的,跑液相摸条件,进一针得十多分钟,这样至少得耗一两个小时
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事在人为/人为事在
5楼
2012-02-17 23:53:13
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xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-19 18:07:22
液相摸条件吧,不过前提是你柱子的填料类型和你高效液相的柱子要一致或者类似。不然真正分离时候分离效果相差很大,另外,做反相之前,最好先试试样品在甲醇-水里的溶解度,实在很差的话不建议用反相。
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浮世绘卷拓不懂濯清涟不妖
9楼
2012-02-18 23:10:08
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13楼
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Originally posted by
qhyy
at 2012-02-19 20:00:33:
请教下,如果用液相摸条件的话,是怎么样操作的,是从甲醇冲起还是从水冲起?怎么样用液相的方式是比较好的一个摸条件手段。
首先你的液相最好是DAD检测器,我自己操作首先就是甲醇-水系统梯度洗脱,10%甲醇-100%甲醇30min,看看峰型和分离效果,如果峰型不好,就考虑加酸,加三乙胺或者缓冲盐之类的改善,如果峰型好,就针对分离效果优化,假设15min左右这段峰杂,分离不好,你大概计算下15min时的甲醇比例,第二针你就用你计算得到的甲醇比例等度洗脱,这时候分离度肯定改善的。要优化哪一段你就这样去做,最后得到的这些等度洗脱的比例就是你上柱子分离的条件了。
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浮世绘卷拓不懂濯清涟不妖
14楼
2012-02-19 23:25:01
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xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-18 21:42:52
可以用走高效液相的情况来确定,我就是这样做的效果挺好的,把能分开的那个区间的条件在细分一下,用低于那个条件的甲醇水条件来做起始的洗脱条件。
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药物分析工作,希望能在这里学习到更多
4楼
2012-02-17 23:24:01
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19楼
:
Originally posted by
miaomiaomao
at 2012-11-02 11:06:54
请问用甲醇-水洗脱的话,对级别有要求没?用分析纯就可以了不?
一般使用分析纯的甲醇就可以了
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20楼
2012-11-02 18:40:17
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xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-18 21:42:44
反相薄层板可以买到。洗脱系统用甲醇-水 试试
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2楼
2012-02-17 21:49:59
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楼
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liupengp02
at 2012-02-17 21:49:59:
反相薄层板可以买到。洗脱系统用甲醇-水 试试
如果没有反向薄层板的话,有别的方法确定洗脱条件没
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3楼
2012-02-17 22:14:09
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xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-18 21:43:02
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3楼
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Originally posted by
qhyy
at 2012-02-17 22:14:09:
如果没有反向薄层板的话,有别的方法确定洗脱条件没
直接上柱 梯度洗脱试试
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2012-02-18 21:19:48
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xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-18 21:43:14
你所说的极性大,是指的正丁醇相吗?如果用反相柱子的话,那一般甲醇和水的梯度洗脱是可以的。先 洗下来的是极性弱的,然后用TLC分析看看有效果没,不耽误时间。一般细分的话还要再过一遍柱子,如果还是不行就要用大孔树脂了。
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8楼
2012-02-18 21:31:31
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karl2100(金币+1): 3Q 2012-02-24 00:58:00
跑液相是最方便的方法,而且摸出来的条件和ods相比,比较具有参考价值,建议试试,
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10楼
2012-02-19 19:17:32
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