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qhyy

银虫 (小有名气)

[求助] 没有ODS反向板,怎么摸条件上ODS柱,求高人解答

最近在分极性大的组分,想用ODS柱,但苦于没有反向板指导柱洗脱,不知依什么样的条件合适,不知各位虫友在遇到这种情况时怎么处理?
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事在人为/人为事在
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乙酰水杨酸

木虫 (正式写手)

KOP

【答案】应助回帖

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xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-19 18:07:22
液相摸条件吧,不过前提是你柱子的填料类型和你高效液相的柱子要一致或者类似。不然真正分离时候分离效果相差很大,另外,做反相之前,最好先试试样品在甲醇-水里的溶解度,实在很差的话不建议用反相。
浮世绘卷拓不懂濯清涟不妖
9楼2012-02-18 23:10:08
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乙酰水杨酸

木虫 (正式写手)

KOP

【答案】应助回帖

引用回帖:
13楼: Originally posted by qhyy at 2012-02-19 20:00:33:
请教下,如果用液相摸条件的话,是怎么样操作的,是从甲醇冲起还是从水冲起?怎么样用液相的方式是比较好的一个摸条件手段。

首先你的液相最好是DAD检测器,我自己操作首先就是甲醇-水系统梯度洗脱,10%甲醇-100%甲醇30min,看看峰型和分离效果,如果峰型不好,就考虑加酸,加三乙胺或者缓冲盐之类的改善,如果峰型好,就针对分离效果优化,假设15min左右这段峰杂,分离不好,你大概计算下15min时的甲醇比例,第二针你就用你计算得到的甲醇比例等度洗脱,这时候分离度肯定改善的。要优化哪一段你就这样去做,最后得到的这些等度洗脱的比例就是你上柱子分离的条件了。
浮世绘卷拓不懂濯清涟不妖
14楼2012-02-19 23:25:01
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