24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 3749  |  回复: 24

qhyy

银虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by liupengp02 at 2012-02-18 21:19:48:
直接上柱  梯度洗脱试试

嗯,我觉得也只能这样了,直接上柱,逐渐递增比例
事在人为/人为事在
11楼2012-02-19 19:52:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qhyy

银虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by fjamigo at 2012-02-18 21:31:31:
你所说的极性大,是指的正丁醇相吗?如果用反相柱子的话,那一般甲醇和水的梯度洗脱是可以的。先 洗下来的是极性弱的,然后用TLC分析看看有效果没,不耽误时间。一般细分的话还要再过一遍柱子,如果还是不行就要用 ...

不是,是乙酸乙酯部的大极性组分,用TLC跑板,点靠的很近,不是很好分,额分的结构分子量又差不多,凝胶效果不好,所以想上上反相
事在人为/人为事在
12楼2012-02-19 19:54:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qhyy

银虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by 乙酰水杨酸 at 2012-02-18 23:10:08:
液相摸条件吧,不过前提是你柱子的填料类型和你高效液相的柱子要一致或者类似。不然真正分离时候分离效果相差很大,另外,做反相之前,最好先试试样品在甲醇-水里的溶解度,实在很差的话不建议用反相。

请教下,如果用液相摸条件的话,是怎么样操作的,是从甲醇冲起还是从水冲起?怎么样用液相的方式是比较好的一个摸条件手段。
事在人为/人为事在
13楼2012-02-19 20:00:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

乙酰水杨酸

木虫 (正式写手)

KOP

【答案】应助回帖

引用回帖:
13楼: Originally posted by qhyy at 2012-02-19 20:00:33:
请教下,如果用液相摸条件的话,是怎么样操作的,是从甲醇冲起还是从水冲起?怎么样用液相的方式是比较好的一个摸条件手段。

首先你的液相最好是DAD检测器,我自己操作首先就是甲醇-水系统梯度洗脱,10%甲醇-100%甲醇30min,看看峰型和分离效果,如果峰型不好,就考虑加酸,加三乙胺或者缓冲盐之类的改善,如果峰型好,就针对分离效果优化,假设15min左右这段峰杂,分离不好,你大概计算下15min时的甲醇比例,第二针你就用你计算得到的甲醇比例等度洗脱,这时候分离度肯定改善的。要优化哪一段你就这样去做,最后得到的这些等度洗脱的比例就是你上柱子分离的条件了。
浮世绘卷拓不懂濯清涟不妖
14楼2012-02-19 23:25:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liupengp02

金虫 (正式写手)

引用回帖:
11楼: Originally posted by qhyy at 2012-02-19 19:52:23:
嗯,我觉得也只能这样了,直接上柱,逐渐递增比例

对,试试吧
你不懂我,我不怪你
15楼2012-02-20 19:48:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qhyy

银虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by 乙酰水杨酸 at 2012-02-19 23:25:01:
首先你的液相最好是DAD检测器,我自己操作首先就是甲醇-水系统梯度洗脱,10%甲醇-100%甲醇30min,看看峰型和分离效果,如果峰型不好,就考虑加酸,加三乙胺或者缓冲盐之类的改善,如果峰型好,就针对分离效果优化 ...

谢谢乙酰水杨酸的建议,令我受益匪浅,在下还有几个问题想请教:
1、在今晚看到你的建议时,我已经上了高效液相,不过因为不太会用,我首先用的是90%的甲醇冲柱子,想把所有的点都冲出来,这种方式不知何时否。
2、还有我在冲的过程中出现了这样一个现象,就是在前10分钟我大部分峰都出来了,但是在26分钟时有一个孤立的峰存在,两者相差了10多分钟,这种情况下我应该怎么做,是加大极性把10分钟前的点峰分开还是怎么做?有没有可能把那26分钟处的峰在制备液相上压到出不来,而其他峰都分开,最后换甲醇把那峰冲出来?
3、是不是在做分析液相时,摸好条件后要把出峰时间,冲洗比例都记下来?然后在制备时在那个时间注意接峰?
还请指点一二,本人初次接触液相,很是不懂,请不吝赐教
事在人为/人为事在
16楼2012-02-24 00:48:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

196399836

新虫 (小有名气)


跑液相是最方便的方法,而且摸出来的条件和ods相比,比较具有参考价值,建议试试
17楼2012-06-01 14:54:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

miaomiaomao

金虫 (小有名气)

学习了
吃嘛嘛香
18楼2012-11-02 09:41:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

miaomiaomao

金虫 (小有名气)

请问用甲醇-水洗脱的话,对级别有要求没?用分析纯就可以了不?
吃嘛嘛香
19楼2012-11-02 11:06:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qhyy

银虫 (小有名气)

引用回帖:
19楼: Originally posted by miaomiaomao at 2012-11-02 11:06:54
请问用甲醇-水洗脱的话,对级别有要求没?用分析纯就可以了不?

一般使用分析纯的甲醇就可以了
事在人为/人为事在
20楼2012-11-02 18:40:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 qhyy 的主题更新
信息提示
请填处理意见