24小时热门版块排行榜    

查看: 5218  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

maweisimple

铁虫 (小有名气)

[交流] 荧光PCR 内控

大家好,最近在思考,实时荧光PCR的试剂往往除了阳性质控品,还添加另一种荧光信号的内控,有些不解,阳性质控品不就是证明试剂没问题的吗,如果阳性质控有信号,外控无信号,说明提取的样本有抑制,而反应试剂是没问题,为什么还要加内控呢?请大家各抒己见,不吝赐教!
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

QPCR 问题简答

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

Ifyouwantsomething,setitfree.Ifitcomesback,itisyours.Ifitdoesn't,itisnever.
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lovelydong

铜虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
maweisimple: 金币+1 2015-02-10 18:23:24
你说的外标是一段保守序列,和目的片段在同一段基因上对吧,在试剂正常前提下如果外标为阴性可能有两种原因:
1,样品中有抑制剂
2,样品中没有基因
这个时候你没法判断。如果加了内控,如果内控也是阴性,那么被抑制了;内控阳性,说明样品中没有基因。
5楼2015-02-10 17:33:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

bbbobo

木虫 (小有名气)


商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
maweisimple: 金币+1, 谢谢 2015-02-10 16:53:34
内参一方面是证明试剂体系没问题,另一方面是进行相对定量
2楼2015-02-10 15:16:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

love_st

金虫 (著名写手)


★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
maweisimple: 金币+3, 很棒 2015-02-10 16:49:07
阳性质控,是为了说明你的试剂没有问题,由于阳性质控并不和你的具体的每一个样本一管扩增。而有时候某个样本是阴性,但是你无法判断是由于真的是阴性呢还是标本有抑制物导致的阴性,这时候就引入内控,也就是所谓的内标,它分两种,一种是管家基因,一种是额外添加进去的质粒或者其它(正常的样本内控或内标就肯定为阳性),和样本一起参与提取,这时候如果标本的目的片段是阴性,而内标也是阴性,说明这个标本可能有抑制物,因为连内标都没有出来,可以稀释下临床样本进行检测,而如果标本的目的片段是阴性,而内标是阳性,那么结果为正常,即,此份样本你的目的片段为阴性,不知道这样解释你是否明白。内标主要用来考察样本扩增的假阴性!
3楼2015-02-10 15:57:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maweisimple

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by love_st at 2015-02-10 15:57:42
阳性质控,是为了说明你的试剂没有问题,由于阳性质控并不和你的具体的每一个样本一管扩增。而有时候某个样本是阴性,但是你无法判断是由于真的是阴性呢还是标本有抑制物导致的阴性,这时候就引入内控,也就是所谓的 ...

嗯嗯,但是针对每个样本,都做一个外控,是目的片段外的另一段保守序列,它如果能扩出来,阳性质控也能扩出来,就说明试剂没问题。如果外控不出,阳性也不出,说明试剂有问题。如果外控不出,阳性出,说明样本有抑制剂。不知道理解的对不对?如果是这样,还有必要加内控吗?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
Ifyouwantsomething,setitfree.Ifitcomesback,itisyours.Ifitdoesn't,itisnever.
4楼2015-02-10 16:48:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +5 雨打竹帘 2026-08-30 9/450 2026-08-30 22:23 by 余韵清
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 4FFAWE8HcgUD 2026-08-29 4/200 2026-08-30 20:21 by hZiFeudZyoGR
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 zICmwzsBXjbN 2026-08-29 5/250 2026-08-30 20:08 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 zICmwzsBXjbN 2026-08-29 5/250 2026-08-30 20:08 by hZiFeudZyoGR
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 3/150 2026-08-30 19:26 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 18:53 by hZiFeudZyoGR
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 18:51 by hZiFeudZyoGR
[公派出国] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +7 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-30 17:34 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +7 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 10/500 2026-08-30 17:33 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +8 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 12/600 2026-08-30 17:11 by hZiFeudZyoGR
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-30 17:03 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +7 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 14/700 2026-08-30 17:01 by hZiFeudZyoGR
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-30 06:10 by ZPa0EcMwuECS
[教师之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-30 05:48 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
请填处理意见