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雪中花sml新虫 (小有名气)
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PCR退火温度设置 已有7人参与
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| 目前做PCR扩增，由于目的基因（1300bp）前面一段GC含量比较高的问题，设置的两条引物，其中一条GC%为80%，Tm为77.7，另一条GC%为45%，Tm为54.3，以大家的经验觉得用这两条引物扩增目的基因的退火温度应该设置为多少呢 |
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chibang1220
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| GC含量这么高，只从退火温度上做改变的话，可能不一定好做，建议也是使用Hot start Taq酶扩增，配合专用的buffer，效果可能不错，个人推荐 |
7楼2015-02-06 16:06:43
zshw_001
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