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jiaoxiayoulu

新虫 (小有名气)

[求助] 这样的RNA能否用来做荧光定量PCR 已有4人参与

如题,求虫友给个理由,第一次提酵母RNA,第一次做定量PCR1快毕业了没什么时间了!在线求解!!!!!!!!

这样的RNA能否用来做荧光定量PCR
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zshw_001

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
跑都跑不出来,RNA不纯吧。
永远相信未知的总是美好的!
2楼2015-02-03 16:34:37
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
都降解完了,重新做吧

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2015-02-03 18:36:46
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jiaoxiayoulu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zshw_001 at 2015-02-03 16:34:37
跑都跑不出来,RNA不纯吧。

谢谢,你的回复,我想再问你一下,我用来提取酵母RNA的菌液是大概一个礼拜前放在-80℃中保存的,当时没有加甘油,直接把养好的菌液保存的!这会不会就是导致RNA详解的主要原因啊!我提了两次都是这样的了!可我用NANODROP测260/280的比值,都在1.8~2以内啊!谢谢,急盼您的回复!
4楼2015-02-04 10:57:31
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jiaoxiayoulu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zshw_001 at 2015-02-03 16:34:37
跑都跑不出来,RNA不纯吧。

我也很纳闷啊!就像之前回复一样,我怀疑是我的菌液不新鲜!菌都冻死了还能提出完整的RNA吗????
5楼2015-02-04 10:59:29
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zshw_001

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by jiaoxiayoulu at 2015-02-04 10:57:31
谢谢,你的回复,我想再问你一下,我用来提取酵母RNA的菌液是大概一个礼拜前放在-80℃中保存的,当时没有加甘油,直接把养好的菌液保存的!这会不会就是导致RNA详解的主要原因啊!我提了两次都是这样的了!可我用N ...

应该直接冻死了,那提的RNA也不能用了,基本就不是细胞生长需要的RNA吧。
永远相信未知的总是美好的!
6楼2015-02-04 17:33:29
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draco1987

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
没用了,赶紧再搞一份吧。
7楼2015-02-05 13:21:48
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wang7x7x

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你孔里的应该是基因组DNA,下面最亮的带应该是降解的RNA,建议取新鲜菌液,离心,取沉淀,液氮冻,加trizol裂解液研磨,然后提取。
生活
8楼2015-02-06 15:21:33
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jiaoxiayoulu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by wang7x7x at 2015-02-06 15:21:33
你孔里的应该是基因组DNA,下面最亮的带应该是降解的RNA,建议取新鲜菌液,离心,取沉淀,液氮冻,加trizol裂解液研磨,然后提取。

谢谢!已经重新养菌,用液氮研磨提取出来了
9楼2015-02-09 19:51:51
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好好学习啊咧

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by jiaoxiayoulu at 2015-02-09 19:51:51
谢谢!已经重新养菌,用液氮研磨提取出来了...

求问一下哈,你用的是什么方法提的RNA?
10楼2016-03-09 20:49:36
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