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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 这样的RNA能否用来做荧光定量PCR
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jiaoxiayoulu

新虫 (小有名气)

[求助] 这样的RNA能否用来做荧光定量PCR 已有4人参与

如题，求虫友给个理由，第一次提酵母RNA，第一次做定量PCR1快毕业了没什么时间了！在线求解！！！！！！！！

这样的RNA能否用来做荧光定量PCR
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1楼 2015-02-03 14:17:31
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zshw_001

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
跑都跑不出来，RNA不纯吧。
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永远相信未知的总是美好的！
2楼2015-02-03 16:34:37
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
都降解完了，重新做吧

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2015-02-03 18:36:46
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jiaoxiayoulu

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zshw_001 at 2015-02-03 16:34:37
跑都跑不出来，RNA不纯吧。

谢谢，你的回复，我想再问你一下，我用来提取酵母RNA的菌液是大概一个礼拜前放在-80℃中保存的，当时没有加甘油，直接把养好的菌液保存的！这会不会就是导致RNA详解的主要原因啊！我提了两次都是这样的了！可我用NANODROP测260/280的比值，都在1.8~2以内啊！谢谢，急盼您的回复！
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4楼2015-02-04 10:57:31
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jiaoxiayoulu

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zshw_001 at 2015-02-03 16:34:37
跑都跑不出来，RNA不纯吧。

我也很纳闷啊！就像之前回复一样，我怀疑是我的菌液不新鲜！菌都冻死了还能提出完整的RNA吗？？？？
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5楼2015-02-04 10:59:29
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zshw_001

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jiaoxiayoulu at 2015-02-04 10:57:31
谢谢，你的回复，我想再问你一下，我用来提取酵母RNA的菌液是大概一个礼拜前放在-80℃中保存的，当时没有加甘油，直接把养好的菌液保存的！这会不会就是导致RNA详解的主要原因啊！我提了两次都是这样的了！可我用N ...

应该直接冻死了，那提的RNA也不能用了，基本就不是细胞生长需要的RNA吧。
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永远相信未知的总是美好的！
6楼2015-02-04 17:33:29
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draco1987

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没用了，赶紧再搞一份吧。
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7楼2015-02-05 13:21:48
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wang7x7x

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你孔里的应该是基因组DNA，下面最亮的带应该是降解的RNA，建议取新鲜菌液，离心，取沉淀，液氮冻，加trizol裂解液研磨，然后提取。
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生活
8楼2015-02-06 15:21:33
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jiaoxiayoulu

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by wang7x7x at 2015-02-06 15:21:33
你孔里的应该是基因组DNA，下面最亮的带应该是降解的RNA，建议取新鲜菌液，离心，取沉淀，液氮冻，加trizol裂解液研磨，然后提取。

谢谢！已经重新养菌，用液氮研磨提取出来了
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9楼2015-02-09 19:51:51
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好好学习啊咧

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by jiaoxiayoulu at 2015-02-09 19:51:51
谢谢！已经重新养菌，用液氮研磨提取出来了...

求问一下哈，你用的是什么方法提的RNA？
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10楼2016-03-09 20:49:36
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