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简并引物PCR求助
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专业: 作物种质资源与遗传育种学
[
求助
]
简并引物PCR求助
已有1人参与
刚刚跑完胶,结果很不好,只能来求助了。
用设计了几对简并引物,开始用降落PCR没有产物,后来就把退火温度降到46度,加4%DMSO,增加镁离子浓度至1.2mM,第一对引物出现了400-2000附近多条杂带(预期1000bp),如图1,marker旁边是空白,居然也有亮带。。。
尝试用第2~4对引物(在第一对之内)进行巢式PCR,结果没条带,还出现了从点样孔到前沿的亮带,如图2,全部都是亮带。。。
我这样用巢式PCR对不对呢,新手入门,求指点问题所在,以及后续办法。
2 .jpg
1 .jpg
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