| 查看: 6740 | 回复: 3 | ||
[求助]
双酶切质粒的保存问题 已有2人参与
|
|
双酶切后胶回收的线性质粒可以在-20度存放多久？会影响后面与目的片段的连接吗？ [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有141人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 如何检测目的片段转没转到质粒上？
已经有16人回复
- 连接效率低，重组质粒无法酶切
已经有5人回复
- 如何获取目的质粒？
已经有8人回复
- 新人，请大侠赐教：构建重组质粒选择双酶切还是单酶切？
已经有13人回复
- 我用sal Ⅰ和xho Ⅰ双酶切链接目的基因，菌落pcr能p出目的条带，但酶切切不开。
已经有18人回复
- 多个质粒兼容性
已经有8人回复
- PCR产物双酶切遇到问题，求救！！！
已经有7人回复
- 有关NEB内切酶NdeI和XhoI的双酶切问题
已经有6人回复
- Nhe I和Hind III 双酶切pcDNA3.1(+)和目的片段2300bp，却连不上，求各位帮忙啊
已经有17人回复
- PCR产物纯化后酶切，连接
已经有28人回复
- pET28a双酶切后连接目的基因，什么也不长。。。
已经有23人回复
- 各种综合问题：酶切 胶回收 质粒浓缩 测浓度
已经有7人回复
- 双酶切后目的片段变大
已经有11人回复
- 连接产物双酶切
已经有11人回复
- 请教PCR产物酶切后是否可以直接过柱纯化而不胶回收？
已经有15人回复
- 质粒酶切切不动，质粒在宿主中繁衍酶切位点会突变么？
已经有8人回复
- （侯氏出品）双酶切连接反应之全攻略
已经有89人回复
- 双酶切粘性末端连接不上
已经有21人回复
- 酶切后未纯化连接出现的问题
已经有18人回复
- 影响酶切的几个主要因素
已经有13人回复
- DNA双酶切后在两端加adapter的连接问题
已经有7人回复
- 纯化后酶切产物的保存
已经有10人回复
- 【求助/交流】双酶切PCR产物的时间
已经有7人回复
- 【求助/交流】请问用ddH2O保存的质粒在-20能保存多长时间？反复冻融会不会有影响？
已经有12人回复
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-01-29 23:07:03
weiranqq: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-01-31 20:39:27
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-01-29 23:07:03
weiranqq: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-01-31 20:39:27
|
一般情况下来说，如果你不确定你的操作时间，切好胶后将胶冻存在-20 会很安全，但也最好在1-2天内操作完成。 如果已经回收的片段，在-20度理论上可以存放，但绝对会影响下步操作，造成你酶切接头损毁，导致连接不成功，这种情况下，在计算摩尔比率的时候，按照 大于1：3 的比率去添加插入片段， 即多加一点插入片段（1：4左右），可以一定程度上提高效率。但不能保证一定成功。 总的来说，如果可以，存放不要超过1-2天，现做先用，如果不做，不要回收，胶体状态更稳定 |
2楼2015-01-29 23:05:13
3楼2015-01-30 00:28:50
 |
4楼2015-01-30 07:30:56
20