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荧光定量PCR遇到难题-求指点已有5人参与
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| 最近正在做荧光定量PCR，制作标准曲线时遇到一个问题，试验中，我把我的目的基因与载体连接后导入到感受态大肠菌中，然后液体培养提质粒，质粒DNA为模板进行定性PCR检测目的基因，检测结果为阳性，到这一步也没有问题，可是我把质粒梯度稀释进行上机跑标准曲线时，结果Ct值都在30以后才出来，怕稀释出问题，重新稀释，也降低退火温度都又各做了一次还是同样的效果，头都大了~跪求高手指点！ |
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