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求助！！帮忙分析一下荧光定量的溶解曲线！！已有1人参与
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第一张是标准曲线和高表达量样品的溶解曲 第二张是低表达量样品的溶解曲线 也就是说二者的差别只在于模板量的多与少，可是这溶解曲线上的“鼓包”着实让人看着不爽啊~~大家帮忙分析一下，看是怎么解决！拜托！拜托！！  1.png  2.png |
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xiaohaixie(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-01-28 22:11:43
xiaohaixie(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-01-28 22:11:43
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你的待测样品ct已经到32左右了。属于比较高的值了。不是很理想，这样的话，加上你的溶解曲线，真的会去怀疑你的低浓度扩增是否非特异。 因为以你的描述，引物使用是一致的，并且模板内容也是一样的，这样的话，高浓度下看起来引物并无太大问题，所以如果你是在做绝对定量，稀释的倍数不要太大，高浓度23cycle，低浓度32cycle这样差异太大了。调整低浓度在26cycle这样就能避免一些奇怪的事情 |
xiaohaixie5楼2015-01-28 18:49:34
2楼2015-01-27 15:18:38
3楼2015-01-27 21:49:20
4楼2015-01-28 11:56:29