应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 溶解曲线出现很多杂峰
61/1返回列表
查看: 6426  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Tao_zi

新虫 (初入文坛)

[求助] 溶解曲线出现很多杂峰 已有1人参与

目的基因的标准曲线做得没有问题，但是在做样品的荧光定量PCR时溶解曲线却出现了很多杂峰，想问一下究竟是什么原因？急求，谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-09-04 10:34:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Tao_zi

新虫 (初入文坛)
我看了一下你提供的相关帖子，和我情况不大一样
赞一下 回复此楼
2楼2014-09-04 21:44:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liweiwei0812

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-09-09 09:54:56
杂峰说明有非特异扩增产物，引物特异性不好，建议重新设计引物。
赞一下 回复此楼
3楼2014-09-05 10:22:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Tao_zi

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by liweiwei0812 at 2014-09-05 10:22:07
杂峰说明有非特异扩增产物，引物特异性不好，建议重新设计引物。

但是坐标线的时候没有任何问题呀，而且在荧光定量仪上摸索退火温度的时候也没有问题
赞一下 回复此楼
4楼2014-09-09 08:55:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Tao_zi

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by liweiwei0812 at 2014-09-05 10:22:07
杂峰说明有非特异扩增产物，引物特异性不好，建议重新设计引物。

但是在荧光定量仪上摸索退火温度的时候没有问题，做标准曲线的时候也没有问题
赞一下 回复此楼
5楼2014-09-09 08:56:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liweiwei0812

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by Tao_zi at 2014-09-09 08:56:50
但是在荧光定量仪上摸索退火温度的时候没有问题，做标准曲线的时候也没有问题...

预实验的时候使用的是待测样本吗？建议先用待测样本进行预实验，实验后将PCR产物跑胶看一下，验证引物。验证引物主要看CT值是不是合适，熔解曲线是否有杂峰，确定没有问题以后再做标准曲线。
赞一下 回复此楼
6楼2014-09-11 16:30:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Tao_zi 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭