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PCR目的片段两端GC含量严重不平衡导致片段扩增不出来 已有5人参与
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PCR目的片段两端GC含量严重不平衡导致片段扩增不出来 3‘端的TA特别多，30bp片段的GC含量只有15% 各位有没有遇到类似问题的？怎么解决啊？ |
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2楼2015-01-23 14:29:47
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5楼2015-01-23 17:58:15
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【答案】应助回帖
| 呵呵，先不要考虑那么复杂的，GC含量不均衡，就是困难模板啊，用好一点的酶扩增试试看，热启动Taq酶或者是稍具保真度的酶，看GC含量普通Taq酶肯定是不行的，行不通再考虑其他方面（要进行大的改动），先从最简单的开始。http://www.detaibio.com/relia-hotstart-polymerase.html |
8楼2015-01-27 10:40:59
