应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 有关western blot 的问题
151/2返回列表12下一页
查看: 2537  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

searush

铜虫 (初入文坛)

[求助] 有关western blot 的问题 已有2人参与

请问下  我做的是NF-KB p65的抗体  显影结果怎么会在目的带中出现两条带呢？求解

有关western blot  的问题
IMG_20150112_170521.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
学术研究
1楼 2015-01-12 17:06:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

searush

铜虫 (初入文坛)
自己顶一个  希望 大虫们指教
赞一下 回复此楼
学术研究
2楼2015-01-12 17:09:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

molizerd

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
searush(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-01-14 20:04:55
这是压片曝光的还是显色的还是机器曝光的？
如果是压片的话是因为你压的胶片动了。其他的你这个是单抗还是多抗？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
3楼2015-01-12 17:33:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
searush(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-01-14 20:05:07
除了楼上说的原因之外，还有就是你在进行PAGE的时候，是一次上样还是两次上样呢，如果是两次上样的话，也会产生这种结果的。整个实验是没什么问题的。
赞一下 回复此楼
todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
4楼2015-01-12 17:37:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

searush

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by molizerd at 2015-01-12 17:33:29
这是压片曝光的还是显色的还是机器曝光的？
如果是压片的话是因为你压的胶片动了。其他的你这个是单抗还是多抗？

机器曝光的
回复此楼
学术研究
5楼2015-01-13 18:21:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

searush

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-01-12 17:37:32
除了楼上说的原因之外，还有就是你在进行PAGE的时候，是一次上样还是两次上样呢，如果是两次上样的话，也会产生这种结果的。整个实验是没什么问题的。

我就上样一次而已
赞一下 回复此楼
学术研究
6楼2015-01-13 18:21:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

searush

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by molizerd at 2015-01-12 17:33:29
这是压片曝光的还是显色的还是机器曝光的？
如果是压片的话是因为你压的胶片动了。其他的你这个是单抗还是多抗？

单抗  CST的抗体
回复此楼
学术研究
7楼2015-01-13 18:22:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

molizerd

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by searush at 2015-01-13 18:22:29
单抗  CST的抗体...

今天我师弟也曝成这样了。。他上样是纯化的原核表达蛋白。。抗体是他自己制备的单抗。。老师说可能是蛋白降解了。。或者你的蛋白样品是不是自己就能形成聚合体，然后成了不同大小的条带。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
8楼2015-01-13 23:58:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

★ ★
searush(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-01-14 20:05:22
引用回帖:
6楼: Originally posted by searush at 2015-01-13 18:21:50
我就上样一次而已...

据我做WB的经验，你这个结果还是没什么本质问题的。我认为可能还是实验过程中操作误差带来的（例如：转膜的时候膜不小心动了一下）。仔细观察两条带的话，不难发现，上下的两条带虽然不在同一个位置，但是应该是一个蛋白的。
机器曝光，采用单抗（GST的抗体或是HIS抗体），这些都是再正常不过了，况且western这个实验本身是没有太大技术含量的，呵呵，只要做的过程中操作上不出现大披露，试剂使用正确，样品确保正常，就应该会成功。
希望对你有所帮助。
赞一下 回复此楼
todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
9楼2015-01-14 09:31:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by searush at 2015-01-13 18:21:50
我就上样一次而已...

还有一个很好办的方法，你观察你的marker，如果marker也是和蛋白的条带一样，都出现双条带的话，就说明了不是样品的问题，而是操作过程中出现的误差。
如果marker是正常的，只有蛋白出现了双条带，那就是样品的问题了。

所以你先确定marker是否正常，谢谢
赞一下 回复此楼
todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
10楼2015-01-14 09:34:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 searush 的主题更新
151/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿中国科学院上海有机所，有机化学356分找调剂 +12 Nadiums 2026-04-09 12/600 2026-04-13 08:50 by lhj2009
[基金申请] 2026 WR青拔 +3 liuchb715 2026-04-09 5/250 2026-04-13 08:46 by 小_小_白虫
[考研] 材料工程085601，270求调剂 +36 @ASDF1234 2026-04-08 39/1950 2026-04-13 08:37 by Delta2012
[考研] 327求调剂 +14 Xxjc1107. 2026-04-06 14/700 2026-04-13 08:31 by Delta2012
[考研] 291求调剂 +11 关忆北. 2026-04-09 12/600 2026-04-12 10:32 by 逆水乘风
[考研] 267求调剂 +8 再忙也要吃饭啊 2026-04-09 8/400 2026-04-11 21:42 by cfdbai
[考研] 调剂 +10 只叙离别辞 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:57 by 逆水乘风
[考研] 中药学调剂 初试324 +4 洋甘菊、 2026-04-10 6/300 2026-04-11 09:41 by gong120082
[考研] 22408调剂求助 +7 毂12 2026-04-09 9/450 2026-04-11 09:23 by 哦哦123
[考研] 284求调剂 +19 梵@@ 2026-04-06 21/1050 2026-04-10 21:12 by zhouxiaoyu
[考研] 263能源动力专硕求调剂 +4 加大号饭盒袋 2026-04-10 4/200 2026-04-10 20:52 by gong120082
[论文投稿] mdpi小修rvr时间四五天了 20+3 哈哈high 2026-04-08 5/250 2026-04-10 16:02 by 北京莱茵润色
[考研] 考研二轮调剂 +8 故人?? 2026-04-09 8/400 2026-04-10 09:44 by 青梅duoduo
[考研] 085601初试330分找调剂 +10 流心奶黄包l 2026-04-09 10/500 2026-04-10 08:14 by Sammy2
[考研] 349学科化学045106求调剂，化学类都可以 +8 保好懂懂 2026-04-08 8/400 2026-04-09 14:03 by xulei3024
[考研] 招收有机化学、化工，药学，食品灯专业学生 +3 yrfhjgdj 2026-04-08 3/150 2026-04-09 10:15 by QYQX_123
[考研] 331求调剂 +5 张元一 2026-04-07 6/300 2026-04-07 22:13 by hemengdong
[考研] 325 调剂 +6 QQ小虾 2026-04-07 6/300 2026-04-07 15:17 by Ccclqqq
[考研] 调剂 +4 mcbbc 2026-04-06 5/250 2026-04-07 12:33 by upczlm1989
[考研] 333求调剂 +6 合乘杨习夕 2026-04-06 6/300 2026-04-07 09:44 by 猪会飞
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭