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lg123456

木虫 (正式写手)

[求助] 色谱峰杂峰问题 已有14人参与

流动相A  磷酸盐
流动相B  甲醇乙腈5-5
梯度:时间  0  - 20 - 30 - 35- 35.01-45
          A:    80    60   25   25   80   80
          B:    20    40    75   75   20   20
上图
30min以后出现杂峰,有什么办法去除吗?谢谢各位大侠

色谱峰杂峰问题
111.png-空白


色谱峰杂峰问题-1
222.png 样品溶液
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longyi706565

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lg123456: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-01-15 08:28:45
磷酸盐要注意和有机相的混合问题,尤其是梯度后期有机相比例过高,混合不好甚至会盐析出,这都会造成基线波动。
建议:1.用2相混合做为流动相
2.优化方法,LZ主峰前没有杂质峰,可适当提高初始比例,降低终比例并延长保留时间,来减缓后段梯度(主峰出峰10’左右即可)
3.不知道LZ为何是乙腈和甲醇混相,若没别的原因可考虑单用乙腈相。
4.不知道LZpH和波长多少,若可以改换醋酸铵试试。
5.若无法改善,LZ 30’后峰对检测没有干扰,可忽略。
以上个人建议,祝好运!
11楼2015-01-13 10:07:16
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匿名

禁虫 (知名作家)

本帖仅楼主可见
4楼2015-01-13 07:01:04
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liukarl

铁杆木虫 (著名写手)

杂质峰的可能性很大

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
敢为天下鲜
5楼2015-01-13 07:14:10
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gwmgyp

版主 (知名作家)

搬砖将

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
梯度变化太快,估计检测波长又接近末端造成的,梯度尽量设置平缓一些,波长除非迫不得已,否则尽量避开末端吸收波长!如果必须选择末端吸收波长,缓冲盐就不要选择有吸收的乙酸/乙酸铵,甲酸或甲酸铵还稍好些!
gwmgyp
9楼2015-01-13 08:40:19
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kittyxiaoqun

铜虫 (初入文坛)

原因乙腈与磷酸盐在线混合时会有很多气泡,先配制成混合样超声后会降低噪音,另外尽量不要选择低波长作为监测波长
13楼2015-01-13 11:19:12
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zkk1222

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
16楼: Originally posted by smalltaocp at 2015-01-14 15:04:57
为什么不能直接变?...

直接变有时候就会产生气泡,这是一个原因,还有就是对于色谱柱来说体系变动太大对柱子也不好;还有就是你看到的情况 基线漂了,很可能就是你变化太快的原因,不信你走一针变换慢的。
17楼2015-01-14 16:23:13
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hyfengldy

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
34针空白都一样,后面的峰可以忽略吧,把缓冲液换成水试试,如果30分钟后仍有色谱峰出现,应该是该检测波长溶剂的末端吸收,和缓冲液无关,如果无色谱峰出现,那换换缓冲液浓度和种类再试试
21楼2015-01-15 14:40:51
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普通回帖

hy258

新虫 (初入文坛)

我怎么觉得不是杂峰,是柱子没冲干净呢?楼主柱子再冲冲呢?
2楼2015-01-12 16:30:46
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lg123456

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hy258 at 2015-01-12 16:30:46
我怎么觉得不是杂峰,是柱子没冲干净呢?楼主柱子再冲冲呢?

但是空白是走了34针的  都一样,样品也是,后面一直存在杂峰
给你点菊花,你就灿烂!
3楼2015-01-12 20:39:27
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liukarl

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能存在极性小的杂质

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
敢为天下鲜
6楼2015-01-13 07:15:41
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iaerbgoerb

新虫 (正式写手)


看起来,是不是梯度鬼峰??
7楼2015-01-13 08:27:11
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1105899896

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这种峰空白样品都有可以忽略的吧。。。。。

[ 发自小木虫客户端 ]
8楼2015-01-13 08:28:26
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dolly8242

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
感觉是柱子里面有残留,用甲醇-水多冲冲吧
新药研发,药品注册
10楼2015-01-13 09:21:21
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