24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1437  |  回复: 4

susannawsj

铜虫 (初入文坛)

[求助] 小分子量蛋白在pET28中表达有什么技巧? 已有2人参与

我有两个蛋白要在pET28中表达,分子量分别为4.3k和11.9k。我
的诱导条件是30度,160rpm,IPTG 1mM。0-12小时分别取样,SDS-page都没有条带。
但同期表达的另两个40和30k的都有很亮的带?
我怀疑是诱导条件不合适;求各位大神指教~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

joyva

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
susannawsj: 金币+9, ★★★很有帮助 2015-06-01 11:14:20
不一定是没表达哦,可能是蛋白太小而你跑胶有问题,一般的SDS-PAGE很难观察到,因为目的蛋白都在最下面,难以分辨出来。我在做一个6.7kD和4.5kD的,用tricein-page胶跑电泳
人生没有彩排,珍惜每一天!
2楼2015-01-09 22:12:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susannawsj

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by joyva at 2015-01-09 22:12:16
不一定是没表达哦,可能是蛋白太小而你跑胶有问题,一般的SDS-PAGE很难观察到,因为目的蛋白都在最下面,难以分辨出来。我在做一个6.7kD和4.5kD的,用tricein-page胶跑电泳

我也用了Tricine-SDSPAGE, 但没有条带
3楼2015-01-10 15:59:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

laojiu9878

至尊木虫 (知名作家)

九牛

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用液相跑一下看看
但愿人长久
4楼2015-01-10 23:05:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

joyva

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by susannawsj at 2015-01-10 15:59:49
我也用了Tricine-SDSPAGE, 但没有条带...

你是用新鲜配制R250染色液染胶吗,我发现陈旧的染液很那染肽类
人生没有彩排,珍惜每一天!
5楼2015-06-10 10:01:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 susannawsj 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 求博导|生物质基多孔碳/超级电容方向,已有相关成果,寻能源材料/碳材料方向老师 +3 猪猪人Zzz 2026-04-12 3/150 2026-04-17 19:10 by 阳阳阳^_^
[有机交流] 二苯甲酮酸类衍生物 50+3 小白爱主人 2026-04-17 6/300 2026-04-17 18:47 by kf2781974
[考研] 一志愿中科大材料与化工,353分还有调剂学校吗 +10 否极泰来2026 2026-04-15 12/600 2026-04-17 17:54 by mapenggao
[考研] 一志愿华中农业071010,320求调剂 +16 困困困困坤坤 2026-04-14 18/900 2026-04-17 17:00 by zhanglin_84
[考研] 0854求调剂 +21 门路摸摸 2026-04-15 25/1250 2026-04-17 15:45 by qzxyhcsy
[考研] 本人女孩 +8 吼吼, 2026-04-10 10/500 2026-04-17 11:28 by 4444si
[考研] 335求调剂 +20 想上岸呀!! 2026-04-12 23/1150 2026-04-17 10:50 by cuisz
[考研] 307中医考研调剂 +6 于以采蘩 2026-04-14 6/300 2026-04-16 16:20 by qingfeng258
[考研] 291求调剂 +11 关忆北. 2026-04-14 11/550 2026-04-16 15:18 by jiahl2024
[考研] 290调剂生物0860 +38 哇哈哈,。 2026-04-11 44/2200 2026-04-16 09:52 by cuisz
[考研] 279学硕食品专业求调剂院校 20+7 孤独的狼爱吃羊 2026-04-12 29/1450 2026-04-16 09:00 by screening
[考研] 通信工程求调剂!!! +6 zlb770521 2026-04-14 6/300 2026-04-15 20:00 by 学员JpLReM
[考研] 085801电气专硕272求调剂 +19 电气李 2026-04-13 21/1050 2026-04-15 13:37 by 黑科技矿业
[考研] 材料工程281还有调剂机会吗 +43 xaw. 2026-04-11 44/2200 2026-04-15 12:46 by 西北望—风沙
[考研] 药学305求调剂 +10 玛卡巴卡boom 2026-04-10 10/500 2026-04-14 15:55 by zs92450
[考研] 085408光电信息工程专硕355一志愿长春光机所调剂 +6 王ymaa 2026-04-13 13/650 2026-04-14 11:33 by 王ymaa
[考研] 300分求调剂 (085501机械专硕,本科扬大) +9 xu@841019 2026-04-11 10/500 2026-04-14 08:48 by 木木mumu~
[考研] 331求调剂 +5 王国帅 2026-04-11 5/250 2026-04-11 22:56 by 溪涧流水
[考研] 求调剂,一志愿大连理工大学354分 +5 雨声余生 2026-04-11 6/300 2026-04-11 16:12 by 雨声余生
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +16 叶zilin 2026-04-10 16/800 2026-04-11 11:04 by may_新宇
信息提示
请填处理意见