24小时热门版块排行榜    

查看: 1510  |  回复: 4

susannawsj

铜虫 (初入文坛)

[求助] 小分子量蛋白在pET28中表达有什么技巧? 已有2人参与

我有两个蛋白要在pET28中表达,分子量分别为4.3k和11.9k。我
的诱导条件是30度,160rpm,IPTG 1mM。0-12小时分别取样,SDS-page都没有条带。
但同期表达的另两个40和30k的都有很亮的带?
我怀疑是诱导条件不合适;求各位大神指教~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

joyva

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
susannawsj: 金币+9, ★★★很有帮助 2015-06-01 11:14:20
不一定是没表达哦,可能是蛋白太小而你跑胶有问题,一般的SDS-PAGE很难观察到,因为目的蛋白都在最下面,难以分辨出来。我在做一个6.7kD和4.5kD的,用tricein-page胶跑电泳
人生没有彩排,珍惜每一天!
2楼2015-01-09 22:12:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susannawsj

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by joyva at 2015-01-09 22:12:16
不一定是没表达哦,可能是蛋白太小而你跑胶有问题,一般的SDS-PAGE很难观察到,因为目的蛋白都在最下面,难以分辨出来。我在做一个6.7kD和4.5kD的,用tricein-page胶跑电泳

我也用了Tricine-SDSPAGE, 但没有条带
3楼2015-01-10 15:59:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

laojiu9878

至尊木虫 (文坛精英)

九牛

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用液相跑一下看看
但愿人长久
4楼2015-01-10 23:05:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

joyva

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by susannawsj at 2015-01-10 15:59:49
我也用了Tricine-SDSPAGE, 但没有条带...

你是用新鲜配制R250染色液染胶吗,我发现陈旧的染液很那染肽类
人生没有彩排,珍惜每一天!
5楼2015-06-10 10:01:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 susannawsj 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +3 西山十月 2026-08-09 4/200 2026-08-09 22:38 by 西山十月
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +10 布布和一二 2026-08-08 21/1050 2026-08-09 17:21 by 天神眷顾
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 5/250 2026-08-08 21:54 by 13586093586
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 17:22 by oEVWOejN9taj
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 17:19 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 5/250 2026-08-08 17:02 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 5/250 2026-08-08 16:27 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:19 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 WQyTGMbfH7Cx 2026-08-07 4/200 2026-08-08 15:02 by oEVWOejN9taj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:42 by oEVWOejN9taj
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:27 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:07 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 有没有H口的?有收到消息的吗? +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
信息提示
请填处理意见