| 查看: 3707 | 回复: 16 | ||
danlv木虫 (小有名气)
|
[求助]
pET28a和pETDuet两个载体的表达强度，哪个更大？ 已有1人参与
|
|
|
假设：用pET28a载体单独表达A基因，用pETDuet载体表达A和B基因，两个载体分别在BL21(DE3)中诱导表达。 pET28a-A的表达强度是不是要比pETDuet-A-B中A的表达强度更大呢？ 单独比较表达蛋白量的话，pET28a-A的中的A蛋白量与pETDuet-A-B中AB蛋白量之和哪个更大呢？ |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有114人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请问有人用双酶切过petduet-1载体吗？用bamHI和Hind3 双酶切
已经有5人回复
- 有谁用过pETDuet-1，交流下
已经有15人回复
- pET28a载体蛋白表达为包涵体
已经有5人回复
- 关于Pet28a载体构建的质粒，蛋白表达量低是怎么回事。请大家帮忙
已经有8人回复
- 载体pTrcHis A和pETDuet-1差别。。谢谢。。
已经有3人回复
- 请教高手：转有pACYCDuet-1和pETDuet-1双载体四基因的共表达问题
已经有9人回复
- 共表达载体只表达出一个蛋白
已经有21人回复
- 用过pET28a(+)表达载体的高人请指教
已经有31人回复
- 【求助/交流】关于PEt-28a质粒载体表达蛋白质的问题
已经有9人回复
alicelchf
木虫 (著名写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 53 (初中生)
- 金币: 2393.2
- 散金: 134
- 红花: 36
- 帖子: 2276
- 在线: 412.1小时
- 虫号: 1279368
- 注册: 2011-04-27
- 性别: MM
- 专业: 蛋白质组学
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
gyesang: 金币+5, 鼓励回帖交流！ 2014-08-28 21:28:04
danlv(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-08-28 21:59:38
gyesang: 金币+5, 鼓励回帖交流！ 2014-08-28 21:28:04
danlv(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-08-28 21:59:38
|
一个Promoter可以控制多个蛋白的转录。但是能控制多长要看Promoter的强度，在PKS的基 因中，一个promoter控制十几个蛋白的表达是很正常的。 stop codon是在翻译这个环节来决定蛋白的终止跟promoter控制的转录是分子生物学中两个不同 的事件。 简单一点说，promoter是负责DNA变成mRNA的，如果如够强的promoter, 使连续3-5个基因发生转录是一点问题都没有的。 比如pET28, 我们在NdeI和XhoI位点克隆一个基因，在基因的后面引入一个SpeI位点，我可以将另一个已 经在pET28的基因用XbaI和SpeI切下来克隆到前一个克隆的SpeI位点上。 这样我就得到了两个基因先后被promoter T7控制。 但是每个基因有自己的RBS(ribosome binding site）和stop Codon, 在翻译的时候核糖体会识别这一头一尾两个位点，表达出两个蛋白。 强度肯定是越排在后面的越弱，但是每个蛋白翻译的速率和半衰期不一样，表达出的量也不 是完全绝对。 当然你也可以每一个蛋白前放一个promoter，最好是不同的，但是如果是同一个promoter， 它们很容易发生重组，造成不稳定。 |
7楼2014-08-28 12:17:35
charles08
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 5813.3
- 散金: 2103
- 红花: 27
- 帖子: 1934
- 在线: 603.9小时
- 虫号: 823046
- 注册: 2009-08-06
- 性别: GG
- 专业: 植物病理学
9楼2014-08-30 11:51:08
2楼2014-08-27 23:13:29
danlv
木虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 1855.7
- 红花: 1
- 帖子: 163
- 在线: 177.2小时
- 虫号: 441090
- 注册: 2007-10-27
- 专业: 微生物遗传育种学
3楼2014-08-28 10:18:05
4楼2014-08-28 10:55:35
5楼2014-08-28 11:12:01
alicelchf
木虫 (著名写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 53 (初中生)
- 金币: 2393.2
- 散金: 134
- 红花: 36
- 帖子: 2276
- 在线: 412.1小时
- 虫号: 1279368
- 注册: 2011-04-27
- 性别: MM
- 专业: 蛋白质组学
6楼2014-08-28 12:16:24
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-08-28 21:28:12
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-08-28 21:28:12
|
本帖内容被屏蔽 |
8楼2014-08-28 19:40:06
charles08
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 5813.3
- 散金: 2103
- 红花: 27
- 帖子: 1934
- 在线: 603.9小时
- 虫号: 823046
- 注册: 2009-08-06
- 性别: GG
- 专业: 植物病理学
10楼2014-08-30 11:52:26
15