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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » pET28a和pETDuet两个载体的表达强度，哪个更大？
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danlv

木虫 (小有名气)

[求助] pET28a和pETDuet两个载体的表达强度，哪个更大？ 已有1人参与

假设：用pET28a载体单独表达A基因，用pETDuet载体表达A和B基因，两个载体分别在BL21(DE3)中诱导表达。

pET28a-A的表达强度是不是要比pETDuet-A-B中A的表达强度更大呢？

单独比较表达蛋白量的话，pET28a-A的中的A蛋白量与pETDuet-A-B中AB蛋白量之和哪个更大呢？
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1楼 2014-08-27 21:57:49
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charles08

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by alicelchf at 2014-08-28 12:16:24
pET28a载体单独表达A基因大于pETDuet载体表达A，这个有文献做对比的
duet双表达是为了研究两种蛋白的相互作用才改造得到的载体。

能否给个文章链接？
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9楼2014-08-30 11:51:08
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charles08

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by alicelchf at 2014-08-28 12:17:35
一个Promoter可以控制多个蛋白的转录。但是能控制多长要看Promoter的强度，在PKS的基
因中，一个promoter控制十几个蛋白的表达是很正常的。

stop
codon是在翻译这个环节来决定蛋白的终止跟promoter控制的转录 ...

有文献证明吗？能否给个链接？
本人正在设计这方面实验
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10楼2014-08-30 11:52:26
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charles08

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
danlv: 金币+3, ★★★很有帮助, 期待高手补充 2014-08-30 18:11:26
通过个人正在做的串联表达情况来看：
我是用28和PACYC做的，综合看肯定是28强
但是PACYC拷贝数少，所以没有可比性

同在一个28载体上，是离启动子越近则越强，这个是我的实验的出来的结果

如果有文献证明的，希望能够给个链接，谢谢！
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11楼2014-08-30 11:54:51
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charles08

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by danlv at 2014-08-30 18:14:13
可否分享一下那篇文献？？...

对，这个很重要
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13楼2014-08-30 20:03:30
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charles08

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by alicelchf at 2014-08-31 16:32:52
晚些时候给你 在另一个电脑里...

非常期待，能否把此类文章名称或者链接也发给我，谢谢
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15楼2014-09-01 08:48:55
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charles08

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by alicelchf at 2014-09-01 16:43:41
Quantitative Co-Expression of Proteins at the Single Cell
Level – Application to a Multimeric FRET Sensor
我不确定是不是这个文献了 你看下 我也是一年前做的这个课题 现在忘得差不多了 我再找找～～～...

下来看看，如果有找到的话，希望共享。这篇我没有看过，谢谢
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17楼2014-09-02 10:49:37
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