应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » pET28a和pETDuet两个载体的表达强度，哪个更大？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
171/2返回列表12下一页
查看: 3419  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

danlv

木虫 (小有名气)

[求助] pET28a和pETDuet两个载体的表达强度，哪个更大？ 已有1人参与

假设：用pET28a载体单独表达A基因，用pETDuet载体表达A和B基因，两个载体分别在BL21(DE3)中诱导表达。

pET28a-A的表达强度是不是要比pETDuet-A-B中A的表达强度更大呢？

单独比较表达蛋白量的话，pET28a-A的中的A蛋白量与pETDuet-A-B中AB蛋白量之和哪个更大呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-08-27 21:57:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

alicelchf

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
gyesang: 金币+5, 鼓励回帖交流！ 2014-08-28 21:28:04
danlv(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-08-28 21:59:38
引用回帖:
5楼: Originally posted by 令狐少陈 at 2014-08-28 11:12:01
why？

一个Promoter可以控制多个蛋白的转录。但是能控制多长要看Promoter的强度，在PKS的基
因中，一个promoter控制十几个蛋白的表达是很正常的。

stop
codon是在翻译这个环节来决定蛋白的终止跟promoter控制的转录是分子生物学中两个不同
的事件。

简单一点说，promoter是负责DNA变成mRNA的，如果如够强的promoter,
使连续3-5个基因发生转录是一点问题都没有的。

比如pET28,
我们在NdeI和XhoI位点克隆一个基因，在基因的后面引入一个SpeI位点，我可以将另一个已
经在pET28的基因用XbaI和SpeI切下来克隆到前一个克隆的SpeI位点上。

这样我就得到了两个基因先后被promoter T7控制。

但是每个基因有自己的RBS(ribosome binding site）和stop Codon,
在翻译的时候核糖体会识别这一头一尾两个位点，表达出两个蛋白。

强度肯定是越排在后面的越弱，但是每个蛋白翻译的速率和半衰期不一样，表达出的量也不
是完全绝对。

当然你也可以每一个蛋白前放一个promoter，最好是不同的，但是如果是同一个promoter，
它们很容易发生重组，造成不稳定。
赞一下(2人) 回复此楼
修身、齐家、治国、平天下
7楼2014-08-28 12:17:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charles08

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by alicelchf at 2014-08-28 12:16:24
pET28a载体单独表达A基因大于pETDuet载体表达A，这个有文献做对比的
duet双表达是为了研究两种蛋白的相互作用才改造得到的载体。

能否给个文章链接？
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2014-08-30 11:51:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

令狐少陈

铜虫 (小有名气)
a hard question！
回复此楼
多多交流，海纳百川
2楼2014-08-27 23:13:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

danlv

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 令狐少陈 at 2014-08-27 23:13:29
a hard question！

期待ing。。。
回复此楼
3楼2014-08-28 10:18:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
很明显28a强度更大

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
4楼2014-08-28 10:55:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

令狐少陈

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by bio_sci at 2014-08-28 10:55:35
很明显28a强度更大

why？
回复此楼
多多交流，海纳百川
5楼2014-08-28 11:12:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alicelchf

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-08-28 21:27:25
pET28a载体单独表达A基因大于pETDuet载体表达A，这个有文献做对比的
duet双表达是为了研究两种蛋白的相互作用才改造得到的载体。
赞一下 回复此楼
修身、齐家、治国、平天下
6楼2014-08-28 12:16:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bolysu

禁虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-08-28 21:28:12
本帖内容被屏蔽
8楼2014-08-28 19:40:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charles08

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by alicelchf at 2014-08-28 12:17:35
一个Promoter可以控制多个蛋白的转录。但是能控制多长要看Promoter的强度，在PKS的基
因中，一个promoter控制十几个蛋白的表达是很正常的。

stop
codon是在翻译这个环节来决定蛋白的终止跟promoter控制的转录 ...

有文献证明吗？能否给个链接？
本人正在设计这方面实验
赞一下 回复此楼
10楼2014-08-30 11:52:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 danlv 的主题更新
171/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +4 QiMing7 2026-03-25 5/250 2026-03-29 21:10 by 唐沐儿
[考研] 291求调剂 +7 Y-cap 2026-03-29 8/400 2026-03-29 19:53 by klasasda
[考研] 277跪求调剂 +6 1915668 2026-03-27 10/500 2026-03-29 16:03 by 王亮_大连医科大
[考研] 求调剂一志愿武汉理工大学材料工程（085601） +7 WW.' 2026-03-23 9/450 2026-03-29 12:42 by fmesaito
[考研] 0856材料化工调剂 总分330 +14 zhubinhao 2026-03-27 14/700 2026-03-29 10:01 by Sjndkwm
[考研] 085701求调剂初试286分 +4 secret0328 2026-03-28 4/200 2026-03-28 21:09 by 15366876211
[考研] 本科新能源科学与工程，一志愿华理能动285求调剂 +7 AZMK 2026-03-28 11/550 2026-03-28 21:01 by xxxsssccc
[考研] 317求调剂 +6 十闲wx 2026-03-24 6/300 2026-03-28 13:27 by Iveryant
[考研] 299求调剂 +7 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 7/350 2026-03-28 13:09 by 唐沐儿
[考研] 085602 307分 求调剂 +7 不知道叫什么！ 2026-03-26 7/350 2026-03-28 09:57 by 神马都不懂
[考研] 272求调剂 +7 脚滑的守法公民 2026-03-27 7/350 2026-03-27 17:23 by laoshidan
[考研] 279 分 求调剂 +4 睡个好觉_16 2026-03-24 4/200 2026-03-27 15:05 by 醉在风里
[论文投稿] Journal of Mechanical Science and Technology +3 Russ_ss 2026-03-25 5/250 2026-03-27 10:49 by 陆小果画大饼
[考研] 0703化学求调剂 +3 丹青奶盖 2026-03-26 5/250 2026-03-26 20:11 by macy2011
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-26 6/300 2026-03-26 18:03 by 邱gl
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +4 钢铁大炮 2026-03-24 4/200 2026-03-26 16:28 by dick_runner
[考研] 网络空间安全0839招调剂 +4 w320357296 2026-03-25 6/300 2026-03-25 17:59 by 255671
[考研] 285求调剂 +3 AZMK 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:23 by userper
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 一志愿南航材料专317分求调剂 +5 炸呀炸呀炸薯条 2026-03-23 5/250 2026-03-24 16:52 by 星空星月
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭