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原核表达大家帮忙看我的目的蛋白怎么没有表达出来
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查看: 2015 | 回复: 6
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lvxiaobu0907
银虫
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专业: 植物生理与生化
[
求助
]
原核表达大家帮忙看我的目的蛋白怎么没有表达出来
已有3人参与
大家帮我看看,我目的蛋白大小60kDa,原核表达加IPTG诱导后4h,取菌液变性后点SDS-PAGE,如图,好像没有目的蛋白表达,请大家帮忙分析分析原因
IMAG0524.jpg
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世事不难,吾辈何用
1楼
2015-01-07 22:24:15
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wuwenmei
新虫
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虫号: 3114800
注册: 2014-04-05
性别: GG
专业: 蛋白质组学
【答案】应助回帖
我以前没做出来,果断换载体和宿主菌,重新开始构建,
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下雨天就算没有伞,我也要学会努力奔跑!
7楼
2015-06-22 18:07:31
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小小cool
金虫
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专业: 免疫相关疾病其他科学问题
★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流
2015-01-08 16:30:17
用rosetta菌试试
[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼
2015-01-08 08:13:45
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dt_lilin
铜虫
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虫号: 3515936
注册: 2014-10-31
专业: 生物化学
【答案】应助回帖
相关条件太少,无法进行判断。如果你在宿主菌和表达过程没有问题的话,就多尝试其他的表达条件吧。
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3楼
2015-01-12 14:34:25
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molizerd
金虫
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帖子: 883
在线: 132.3小时
虫号: 2293838
注册: 2013-02-22
专业: 微生物学
【答案】应助回帖
四个小时??我都是诱导20到24小时。。。。。还有你要摸索下这个iptg浓度以及温度是否合适呀。
[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼
2015-01-12 17:36:43
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