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原核表达大家帮忙看我的目的蛋白怎么没有表达出来
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lvxiaobu0907
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原核表达大家帮忙看我的目的蛋白怎么没有表达出来
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大家帮我看看,我目的蛋白大小60kDa,原核表达加IPTG诱导后4h,取菌液变性后点SDS-PAGE,如图,好像没有目的蛋白表达,请大家帮忙分析分析原因
IMAG0524.jpg
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世事不难,吾辈何用
1楼
2015-01-07 22:24:15
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kx444555: 金币+1, 鼓励交流
2015-01-08 16:30:17
用rosetta菌试试
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2楼
2015-01-08 08:13:45
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dt_lilin
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专业: 生物化学
【答案】应助回帖
相关条件太少,无法进行判断。如果你在宿主菌和表达过程没有问题的话,就多尝试其他的表达条件吧。
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3楼
2015-01-12 14:34:25
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molizerd
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专业: 微生物学
【答案】应助回帖
四个小时??我都是诱导20到24小时。。。。。还有你要摸索下这个iptg浓度以及温度是否合适呀。
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4楼
2015-01-12 17:36:43
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xiangqin90
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请问楼主你的蛋白现在表达出来了么?
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想要做的更好
5楼
2015-06-18 11:05:06
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lvxiaobu0907
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5楼
:
Originally posted by
xiangqin90
at 2015-06-18 11:05:06
请问楼主你的蛋白现在表达出来了么?
没有呢,
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世事不难,吾辈何用
6楼
2015-06-19 07:39:17
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wuwenmei
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专业: 蛋白质组学
【答案】应助回帖
我以前没做出来,果断换载体和宿主菌,重新开始构建,
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下雨天就算没有伞,我也要学会努力奔跑!
7楼
2015-06-22 18:07:31
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