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lvxiaobu0907

银虫 (小有名气)

[求助] 原核表达大家帮忙看我的目的蛋白怎么没有表达出来 已有3人参与

大家帮我看看,我目的蛋白大小60kDa,原核表达加IPTG诱导后4h,取菌液变性后点SDS-PAGE,如图,好像没有目的蛋白表达,请大家帮忙分析分析原因

原核表达大家帮忙看我的目的蛋白怎么没有表达出来
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世事不难,吾辈何用
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小小cool

金虫 (正式写手)

★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2015-01-08 16:30:17
用rosetta菌试试

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2015-01-08 08:13:45
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dt_lilin

铜虫 (初入文坛)


【答案】应助回帖

相关条件太少,无法进行判断。如果你在宿主菌和表达过程没有问题的话,就多尝试其他的表达条件吧。
3楼2015-01-12 14:34:25
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molizerd

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

四个小时??我都是诱导20到24小时。。。。。还有你要摸索下这个iptg浓度以及温度是否合适呀。

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2015-01-12 17:36:43
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xiangqin90

新虫 (初入文坛)

请问楼主你的蛋白现在表达出来了么?
想要做的更好
5楼2015-06-18 11:05:06
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lvxiaobu0907

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by xiangqin90 at 2015-06-18 11:05:06
请问楼主你的蛋白现在表达出来了么?

没有呢,
世事不难,吾辈何用
6楼2015-06-19 07:39:17
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wuwenmei

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我以前没做出来,果断换载体和宿主菌,重新开始构建,
下雨天就算没有伞,我也要学会努力奔跑!
7楼2015-06-22 18:07:31
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