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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 关于跑胶条带
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落叶的轨迹

金虫 (初入文坛)

[求助] 关于跑胶条带 已有1人参与

提了拟南芥的RNA并反转成了cDNA，测了浓度还可以。就用RNA和cDNA以及水做了PCR，想鉴定下提的RNA里有没有基因组污染（片段大小是不到700bp），结果有三次都是全部都有条带，自己认为的理想结果使只有cDNA有条带，其余两个没有。后来又重新提了RNA，这次跑胶一个条带都没有。确实是不知为什么了，有知道为什么的么？不胜感激
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1楼 2015-01-05 16:15:56
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liuderong

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
第一次用水都可以P出条带那应该是体系有污染，如果排除这种污染，那可能第一次提的RNA也P不出带来，和第二次一样。第二次应该是没有污染了，我觉得你可以换一下其他引物试试，做的时候带个对照，确认酶、buffer之类的没有问题。
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落叶的轨迹
2楼2015-01-06 11:16:33
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落叶的轨迹

金虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by liuderong at 2015-01-06 11:16:33
第一次用水都可以P出条带那应该是体系有污染，如果排除这种污染，那可能第一次提的RNA也P不出带来，和第二次一样。第二次应该是没有污染了，我觉得你可以换一下其他引物试试，做的时候带个对照，确认酶、buffer之类 ...

嗯嗯，用的是mix，我也怀疑是引物的问题。谢谢你

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2015-01-07 07:27:49
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