应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 为什么我的微小RNA跑胶条带是一团一团的而不是一条一条的带呢 跪谢
41/1返回列表
查看: 1312  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

jinqimaggie

铁虫 (小有名气)

[交流] 为什么我的微小RNA跑胶条带是一团一团的而不是一条一条的带呢 跪谢

如图所示，我每条lane的每条带都是一团。。。很模糊很胖。。而人家文献里的都是漂亮的小矩形带。。
我是用p32标记的RNA 然后跑15%polyacrylamide胶
请各位大神帮我分析一下 看看实验过程中哪些需要注意哒？
谢谢！！
为什么我的微小RNA跑胶条带是一团一团的而不是一条一条的带呢 跪谢
End User 2013-07-18 15hr 01min 6hr 2hr incub.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-10-10 05:06:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+5, 鼓励交流！ 2013-11-05 11:51:30
你这图弥散太厉害,所以我也说不太准,不过有以下可能性:
1. 你这RNA可能有点降解,试验中加Rnase抑制剂,用DEPC处理水,反正注意减少Rnase干扰或许能有帮助
2. 你这是跑的尿素胶还是EMSA(native gel)? 图上有加蛋白的泳道吗?看起来好像有三种条带. 如果怀疑降解了的话, 可以先跑个尿素胶看看.虽然我不太相信,听别人说在native gel上有时候RNA有不同的二级结构,所以最好用前先95度3分钟破坏二级结构, 然后冷却, 使其主要形成最稳定的二级结构, 减少其他不同的二级结构. 不过如果是尿素胶大概就无所谓了.
3. P32标记的时候, 有时候ATP没除干净底下会有一大坨,可能你这个看到的就是ATP
4.而且我觉得你的强度也不太够啊, 似乎就是p32标记得不太好
赞一下 回复此楼
2楼2013-10-10 05:17:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jinqimaggie

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2013-10-10 05:17:30
你这图弥散太厉害,所以我也说不太准,不过有以下可能性:
1. 你这RNA可能有点降解,试验中加Rnase抑制剂,用DEPC处理水,反正注意减少Rnase干扰或许能有帮助
2. 你这是跑的尿素胶还是EMSA(native gel)? 图上有加蛋白的 ...

谢谢：），我用的是UREA TBE polyacrylamide胶  
P32半衰期可能会影响信号。。 但是我的条带实在是太胖了。。我做transcription时也加了RnaseIhibitor 不知道是不是降解。
赞一下 回复此楼
3楼2013-10-10 05:30:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沙门小rna

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我的图也是。。。你上样量多少？估计上样量太多了
赞一下 回复此楼
4楼2013-11-04 20:36:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jinqimaggie 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +4 西山十月 2026-08-09 6/300 2026-08-10 00:16 by liufeng0619
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +4 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-09 22:24 by otj2008
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +10 布布和一二 2026-08-08 21/1050 2026-08-09 17:21 by 天神眷顾
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 5/250 2026-08-08 21:54 by 13586093586
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 有没有H口的？有收到消息的吗？ +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭