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soffy0214

铜虫 (小有名气)

[求助] 植物RNA提取，跑出五条带。并且一直降解，快疯了！！！

trizol法提取植物叶片。以下是这几天提的，谁能告诉我到底是什么原因？为什么第一次和第三次提的都好像有五条带。

6.27



6.28



7.1
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上帝关上一扇门，就会打开一扇窗。
1楼 2012-07-01 13:50:23
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回帖置顶 ( 共有1个 )

shenye.judy

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+4, MolEPI+1, 鼓励发帖帮助解决问题！ 2012-07-01 17:47:20
6.27这张还行，主带还行（听说过提的好就不止3条带，具体我也没研究过），
6.28基本3条带，也行，似乎琼脂糖没做好，背景有模糊，然后导致条带也模糊，琼脂糖一定要溶透，
7.1降解可能严重了些，你看第三个，小分子的最亮，说明有些降解了！
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2楼2012-07-01 14:11:32
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普通回帖

dfl204

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
7月1日的是降解了。

有很多材料rna提出来是有多条带的，个人认为前2次的可以用
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3楼2012-07-01 18:19:37
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zqk0532

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
植物 的茎叶提出来的是多条带的，因为里面有叶绿体RNA在，根的话提出来就是三条带，希望对你有用
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4楼2012-07-01 22:19:07
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chaoge5819

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
RNA质量还可以，可以用于后续试验，我一直做，没问题的
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5楼2012-07-02 10:13:09
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sk_yb

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个质量的RNA还是可以的。提取过程中注意低温快速，还有改进余地。
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6楼2012-07-02 13:56:18
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soffy0214

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by sk_yb at 2012-07-02 13:56:18
这个质量的RNA还是可以的。提取过程中注意低温快速，还有改进余地。

我换用了根的，用氯仿抽提两次，提出了三条带，但是浓度低了。
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上帝关上一扇门，就会打开一扇窗。
7楼2012-07-02 14:04:52
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sk_yb

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by soffy0214 at 2012-07-02 14:04:52
我换用了根的，用氯仿抽提两次，提出了三条带，但是浓度低了。...

只要质量好，浓度低一点也没有关系。如果要追求高浓度可以增加样品用量，或减少回溶体积。祝你好运。
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8楼2012-07-02 14:33:50
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yangqi

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by shenye.judy at 2012-07-01 14:11:32
6.27这张还行，主带还行（听说过提的好就不止3条带，具体我也没研究过），
6.28基本3条带，也行，似乎琼脂糖没做好，背景有模糊，然后导致条带也模糊，琼脂糖一定要溶透，
7.1降解可能严重了些，你看第三个，小分 ...

你好，我的提了几次RNA，是细菌的，每次有4条带，在28S上不远还有一条，大小和DL2000的最大条带一直，但是条带很清晰。不像是降解的，请问这种可用吗？谢谢！我是新手，也不太懂这方面。
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人生，只有坚强，才能美好！
9楼2012-07-18 10:37:21
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jl860822

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

6.28的还可以，我以前做过几个月的RNA，给你提几个建议吧，可能会对你的实验有帮助：首先建议你重新配制你的TBE缓冲液，配胶用新的电泳液；然后你把电泳槽中的电泳液全换成新的，其次提完一次RNA后，一定要把所有用过的东西都做处理，避免下次污染；电泳时间不要太长，我以前做的时候都是150v跑10min就差不多，以上是一家之言，选择性尝试
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10楼2012-07-18 16:27:04
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