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德玛西亚的爱

铁虫 (初入文坛)

[求助] 液相色谱出峰情况 已有3人参与

本人做液相色谱,检测代谢产物含量,一种真菌产物,发酵周期11天,液态发酵,接种培养一天后,检测产物结果显示很大很大,怀疑是不是培养基里面有和我待测产物相似结构物质存在,培养基直接进样(抽滤后),色谱基本不出峰,但是我把培养基萃取后;萃取液为甲醇:乙酸乙酯:甲苯(7:3:1),离心取上清液,甲醇稀释10倍,色谱进样,峰面积很大很大,为什么会这样,求大神解答
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德玛西亚的爱
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wadecao

禁虫 (正式写手)

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4楼2015-01-04 13:05:58
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laoliu2962

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
产物是胞内还是胞外,脂溶性亦或水溶性?
您所说的“培养基”是灭菌前还是灭菌后的啊?比如葡萄糖灭菌前和灭菌后,分子构象大不相同
2楼2014-12-25 22:50:44
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德玛西亚的爱

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by laoliu2962 at 2014-12-25 22:50:44
产物是胞内还是胞外,脂溶性亦或水溶性?
您所说的“培养基”是灭菌前还是灭菌后的啊?比如葡萄糖灭菌前和灭菌后,分子构象大不相同

真菌毒素,桔霉素,代谢产物在胞外,脂溶性,我用的培养基是PDB,刚好有葡萄糖,灭菌后的培养基
德玛西亚的爱
3楼2014-12-27 14:42:41
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德玛西亚的爱

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wadecao at 2015-01-04 13:05:58
取相同体积的水,用你的萃取剂萃取,离心取上清液,甲醇稀释10倍,色谱进样,看看有没有峰出现

检测某一物质,检测的波长为254nm,最近直接甲苯进样(萃取液含有甲苯),峰面积可大了,今天用紫外分光光度计扫了下,甲苯在254nm处有吸收峰。以前之所以峰面积很大,可以判断为是甲苯在干扰它,现在准备用哥们你提供的方法进样看看,甲醇稀释10倍,100倍,1000倍,目的是为了消除甲苯的干扰,不知道稀释倍数大了,我的物质在不在检测限里面。
德玛西亚的爱
5楼2015-01-05 18:21:11
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