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lanlan1119

金虫 (小有名气)

[求助] 求教:液相色谱溶剂出现异常溶剂峰的问题。

具体情况如下:
液相走梯度流动相A:水:三氟乙酸=1000:1
                  流动相B:乙腈:三氟乙酸=1000:1
                 梯度方法:0min     A%        B%
                                   0        100         0
                                   1        100         0
                                   15       82         18
                                   50       82         18
                                   110     40          60
                                   111     100        0
                                   120      100       0
之前做的时候0至120min,除了2-3min处有个溶剂峰外,其余均无溶剂峰,但最近两天在80min后(80-110mi )出现三个挨着的大溶剂峰,峰很宽。
因溶解相是磷酸盐溶液,昨天就考虑到是不是天气热磷酸盐变质导致有溶剂峰出现,就进了一针纯化水,没有80-110min的溶剂峰了,就把溶解相重新配了之后一切都正常了。但一直做到昨天晚上流动相A快用光了,就重新配了流动相A后稳机子,又进溶剂结果又出现80-110min处的溶剂峰,今早又进纯化水溶剂峰仍在大小跟做完差不多,又重新配制了流动相A后,溶剂峰小了很多,但仍然有。以上过程配制流动相和溶解相的试剂均未更换过厂家和批号。

请各位高手帮忙分析下,以上情况最可能引入污染的是什么,难道是纯化水吗?
我们公司的纯化水是空调制水系统循环制备提供的。
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xbqewpq

荣誉版主 (著名写手)

魂兮

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
把流动相B也重新配一下吧,这个未知因素很多啊
红颜远,相思苦,几番意,难相付。十年情思百年渡,不斩相思不忍顾!
2楼2012-07-07 14:46:20
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yugijiang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xbqewpq: 金币+1, 应助辛苦 2012-07-07 15:46:52
根据你的描述貌似是你的流动相出问题,0.1%TFA的流动相最好是现配现用,而且过滤和超声一个都不能落下。TFA挥发性很强的,非常容易产生气泡。你的仪器有在线脱气机吗?
还有你们的纯化水最好是用超纯水仪再处理下,梯度用的溶剂纯度要求还是高点好。
3楼2012-07-07 14:51:48
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lanlan1119

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yugijiang at 2012-07-07 14:51:48
根据你的描述貌似是你的流动相出问题,0.1%TFA的流动相最好是现配现用,而且过滤和超声一个都不能落下。TFA挥发性很强的,非常容易产生气泡。你的仪器有在线脱气机吗?
还有你们的纯化水最好是用超纯水仪再处理下, ...

有在线脱气机,流动相A刚才写错了,应该是“水三氟乙酸(1000:1):乙腈三氟乙酸(1000:1)=950:50”
4楼2012-07-07 15:01:17
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