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xiaolongxia

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】液相色谱柱压升高及出峰时间延长问题 已有14人参与

本人使用的是岛津LC-10ATvp的液相色谱仪,前几天使用时发现柱压升高(以前用流动相冲洗时最高一般10MPa,最近最高值却升至12MPa)但出峰时间基本未变,可这两天做液相,发现各峰保留时间不同程度的延长,有的峰推迟7分多钟,在采样时间内未出峰,观察流动相冲洗时的压力,最高达到13MPa.请各位大侠指点迷津
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leolee7882

金虫 (小有名气)


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如果你能排除柱子以外的系统堵塞(可能性是有的,采用逐步排除法,很简单),这里只给你分析柱子堵塞的原因。植物提取液成分很复杂的,特别是浸提液,除了你要的有效成分外,还会有极性比较大的糖类,蛋白类,鞣质等,这些都会伤柱子,主要体现在易堵塞柱子筛板,柱头析出等导致系统压力升高及柱效下降。这种情况下,可以考虑柱子反冲,用强洗脱溶剂。第二方面,柱子已使用较长时间,半年,部分Si-O键断裂,导致Si-OH裸露较多。你是茶叶提取物,碱性成分较多,这会导致其在柱子上次级保留较强,较难洗脱下来,表现就是你说的有些成分保留时间延长,这些成分就是茶叶碱。另外建议,你这个柱子使用成本已够了,做植提用半年不错了,可以考虑换新的了
14楼2010-10-19 12:03:20
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普通回帖

fyp05596768

金虫 (小有名气)


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柱子堵住,导致流动相洗脱能力较差,推迟了组分的出峰时间
2楼2010-10-14 09:43:54
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zhongweikong

新虫 (小有名气)


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是不是吸滤头堵塞了啊,清洗一下试试
3楼2010-10-14 09:48:13
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xiaolongxia

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by fyp05596768 at 2010-10-14 09:43:54:
柱子堵住,导致流动相洗脱能力较差,推迟了组分的出峰时间

柱子仅仅使用了半年呀,怎样挽救呢?谢谢了~
4楼2010-10-14 09:56:44
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xiaolongxia

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by zhongweikong at 2010-10-14 09:48:13:
是不是吸滤头堵塞了啊,清洗一下试试

我开始也认为是虑头堵塞,然后用蒸馏水超声洗过几次,每次大约十五分钟。洗好之后继续试验,压力会稍有降低,可再次实验时压力仍居高不降~难道是清洗方法不当?还是其他原因呢?
5楼2010-10-14 10:00:54
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lemonin2008

铁杆木虫 (正式写手)


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你的流动是什么,是不是柱子的筛网有堵塞呢
6楼2010-10-14 10:07:11
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zxwcn

铁杆木虫 (著名写手)


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引用回帖:
Originally posted by xiaolongxia at 2010-10-14 10:00:54:

我开始也认为是虑头堵塞,然后用蒸馏水超声洗过几次,每次大约十五分钟。洗好之后继续试验,压力会稍有降低,可再次实验时压力仍居高不降~难道是清洗方法不当?还是其他原因呢?

怎么能用蒸馏水超呢?先用异丙醇,再用甲醇
7楼2010-10-14 10:12:54
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yjj1314

金虫 (小有名气)


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先确定是柱子的问题还是系统管路的问题,卸下柱子接个二通看看压力正不正常,如果是柱子堵了就只能冲洗了。如果你的流动相中有盐,先用10%甲醇水冲,再用100%甲醇冲,要是还不行就要反冲了。
8楼2010-10-14 10:16:29
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一介书生abc

金虫 (小有名气)


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检查 过滤头、脱气装置、柱子、管路、检测池是否堵塞。另外清洗不用蒸馏水,大哥。最起码甲醇、异丙醇。再不行,用亚砜。
9楼2010-10-14 10:18:25
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xiaolongxia

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by lemonin2008 at 2010-10-14 10:07:11:
你的流动是什么,是不是柱子的筛网有堵塞呢

流动相是甲醇:水:乙酸(26:73.5:0.5)样品是茶叶浸提液,现在真的怀疑是不是茶叶中的一些成分附着在柱子上,造成柱子堵塞了
10楼2010-10-14 10:21:07
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