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guxiaolong

金虫 (小有名气)

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[交流] 求教关于液相色谱柱的问题

本人不会做液相色谱分析。但是试验需要用它来检测5种脱氧核苷的含量。查文献有以下较为简便的方法：
色谱柱：symmetryshield TM RP18柱(150x3．9mm，靴m)；流动相：0．1％(V：V)磷酸(H3P04)，并用三乙胺调PH值为3．O；流速：1．OmL／min；检测器波长：273nm；柱温：25"(2；灵敏度：2．0000AUFS；进样量20ul。

但是我这边只有C18的柱子。我想用上面的条件来做。
不知道C18柱子和symmetryshield TM RP18柱子有何区别，不知是否可以用上面的流动相。

[ Last edited by guxiaolong on 2011-12-12 at 23:01 ]

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1楼 2011-12-12 18:27:19

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刘伟2009

金虫 (小有名气)

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guxiaolong(金币+2): 2011-12-12 23:03:35
lk590(金币+1): 谢谢参与 2011-12-13 07:59:02

我之前也用过液相，有些了解，这里就谈谈我的看法。供你参考。
C18(C-18)、ODS、RP18(RP-18)虽然都是十八烷基键合固定相，但还是有一定区别的。目前用的主要有三种。
1)普通的C18或相应的C8色谱柱，如Waters的Symmetry C18或C8，YMC的Pack Pro C18或C8，Agilent的RX C8等，其它公司如菲罗门和热电也有相应的色谱柱;
2)封端处理的或者极性嵌入型色谱柱，如Waters的Symmetry Shield RP18或RP8，XTerra RP18或RP8，YMC的ODS AQ，Agilent的Zorbax SB AQ等，其它公司如菲罗门和热电也有相应的色谱柱;
3)填料用其它官能团修饰过的色谱柱，如苯基柱等，很多公司都有。
   一般认为C18是连接了18烷基碳链的反相固定相的总称，除了硅胶基质外，还可以包括其他基质的填料，比如高聚物小球为基质及其它新型基质键合C18链形成的反相固定相。而ODS是以硅胶或陶瓷为基质键合的C18填料。因为大部分C18柱是硅胶基质，因此，在很多场合二者是一样的。
   ODS其后所标的1、2、3、4、5有的是指含碳量的不同，有的是不同代的替换产品，如Spherisorb的ODS-1是指未经封尾处理的,含碳量为5.75%，ODS-2是经封尾处理的，含碳量为11.5%。不同厂家的ODS柱性能差异很明显。
   RP在不同厂家中使用的含义也不太一致，在Waters的色谱柱中，RP18（8）是指经过改进的新型C18（8）柱，其不同在于在经典直链配体之间内嵌极性基团，其选择性同C18（8）有很大的差异，特别是对含酚基官能团的化合物。Agilent的Bonus－RP柱中RP的含义同Waters。但是在Merck公司的色谱柱中，RP-18同C18意义相同，包括硅胶基质、氧化铝基质、聚合物基质及一体化的Chromolith柱。
因此，光从C18（C-18）、RP18(RP-18)、ODS字面上很难区别不同厂家色谱柱之间的差异，最好从有关厂家的资料中寻找。
建议：你可以用上面的流动相试一试，应该是没有问题的。

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4楼2011-12-12 20:51:46

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lslcpu

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lk590(金币+1): 谢谢参与 2011-12-13 07:59:09

有区别的。
SymmetryShield RP18是waters公司的分析柱，有自己的一些特点。
1）高亲水或全水性
2）在宽的pH范围（2-8）显著改善碱性物质的峰型
3）有自己独特的选择性，相对于普通C18
4）高度重现性
总结来说，就是一根非常好的柱子，比一般的C18柱子好。
至于你的问题，先要看下你的色谱条件是否苛刻，符合一般柱子使用不，如果符合一般柱子使用条件，可以使用普通C18，使用后能否峰型好且分离度好那就是另一回事了，需要试验了。

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3楼2011-12-12 20:35:38

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