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求教关于液相色谱柱的问题
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本人不会做液相色谱分析。但是试验需要用它来检测5种脱氧核苷的含量。查文献有以下较为简便的方法: 色谱柱:symmetryshield TM RP18柱(150x3.9mm,靴m);流动相:0.1%(V:V)磷酸(H3P04),并用三乙胺调PH值为3.O;流速:1.OmL/min;检测器波长:273nm;柱温:25"(2;灵敏度:2.0000AUFS;进样量20ul。 但是我这边只有C18的柱子。我想用上面的条件来做。 不知道C18柱子和symmetryshield TM RP18柱子有何区别,不知是否可以用上面的流动相。 [ Last edited by guxiaolong on 2011-12-12 at 23:01 ] |
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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
guxiaolong(金币+2): 2011-12-12 23:03:35
lk590(金币+1): 谢谢参与 2011-12-13 07:59:02
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
guxiaolong(金币+2): 2011-12-12 23:03:35
lk590(金币+1): 谢谢参与 2011-12-13 07:59:02
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我之前也用过液相,有些了解,这里就谈谈我的看法。供你参考。 C18(C-18)、ODS、RP18(RP-18)虽然都是十八烷基键合固定相,但还是有一定区别的。目前用的主要有三种。 1)普通的C18或相应的C8色谱柱,如Waters的Symmetry C18或C8,YMC的Pack Pro C18或C8,Agilent的RX C8等,其它公司如菲罗门和热电也有相应的色谱柱; 2)封端处理的或者极性嵌入型色谱柱,如Waters的Symmetry Shield RP18或RP8,XTerra RP18或RP8,YMC的ODS AQ,Agilent的Zorbax SB AQ等,其它公司如菲罗门和热电也有相应的色谱柱; 3)填料用其它官能团修饰过的色谱柱,如苯基柱等,很多公司都有。 一般认为C18是连接了18烷基碳链的反相固定相的总称,除了硅胶基质外,还可以包括其他基质的填料,比如高聚物小球为基质及其它新型基质键合C18链形成的反相固定相。而ODS是以硅胶或陶瓷为基质键合的C18填料。因为大部分C18柱是硅胶基质,因此,在很多场合二者是一样的。 ODS其后所标的1、2、3、4、5有的是指含碳量的不同,有的是不同代的替换产品,如Spherisorb的ODS-1是指未经封尾处理的,含碳量为5.75%,ODS-2是经封尾处理的,含碳量为11.5%。不同厂家的ODS柱性能差异很明显。 RP在不同厂家中使用的含义也不太一致,在Waters的色谱柱中,RP18(8)是指经过改进的新型C18(8)柱,其不同在于在经典直链配体之间内嵌极性基团,其选择性同C18(8)有很大的差异,特别是对含酚基官能团的化合物。Agilent的Bonus-RP柱中RP的含义同Waters。但是在Merck公司的色谱柱中,RP-18同C18意义相同,包括硅胶基质、氧化铝基质、聚合物基质及一体化的Chromolith柱。 因此,光从C18(C-18)、RP18(RP-18)、ODS字面上很难区别不同厂家色谱柱之间的差异,最好从有关厂家的资料中寻找。 建议:你可以用上面的流动相试一试,应该是没有问题的。 |
4楼2011-12-12 20:51:46
2楼2011-12-12 19:06:55
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guxiaolong(金币+2): 2011-12-12 23:02:46
lk590(金币+1): 谢谢参与 2011-12-13 07:59:09
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guxiaolong(金币+2): 2011-12-12 23:02:46
lk590(金币+1): 谢谢参与 2011-12-13 07:59:09
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有区别的。 SymmetryShield RP18是waters公司的分析柱,有自己的一些特点。 1)高亲水或全水性 2)在宽的pH范围(2-8)显著改善碱性物质的峰型 3)有自己独特的选择性,相对于普通C18 4)高度重现性 总结来说,就是一根非常好的柱子,比一般的C18柱子好。 至于你的问题,先要看下你的色谱条件是否苛刻,符合一般柱子使用不,如果符合一般柱子使用条件,可以使用普通C18,使用后能否峰型好且分离度好那就是另一回事了,需要试验了。 |
3楼2011-12-12 20:35:38
5楼2011-12-13 09:00:39













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