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xing_dandan

木虫 (正式写手)

[求助] 液相色谱出峰及柱压变化问题 已有6人参与

安捷伦高效液相
色谱条件:流动相:甲醇:0.2%磷酸水(40: 60);流速:1 mL/min; 检测波长:225 nm;柱温:35 ℃;进样体积:20 μL
以前相同条件下做的时候柱压一般会在190~220 bar之间,现在做了几次最初达到平衡的柱压都只有170 bar左右,更奇怪的是进完样品后柱压就开始下降,基线下移,2~3 min会出一个溶剂峰,再后面柱压降到120 bar左右不变,基线下移厉害,在负值处走平,样品峰一直不出现,这大概会是什么原因呢?
液相色谱出峰及柱压变化问题
图片1.png
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天道酬勤*_*
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jiafengtang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
xing_dandan: 金币+1, ★有帮助, 用的自动进样,如果液相比例阀没问题的话,流动相应该是没问题的,pH是3左右,进样前基线是走平的 2014-03-06 12:38:22
你这个流动相确定没问题吗(PH、浓度)?在进样前基线跑平了没有?
2楼2014-03-06 11:59:44
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炜少

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
xing_dandan: 金币+1, ★有帮助, 是自动进样,进样前是进了一针纯甲醇,后来选择洗针进样,每针进完都会自动清洗,但结果还是一样的 2014-03-06 12:40:23
自动进样的吧,进样针未清洗,灌注下进样针就行,确保进样针里是流动相。
Whenthepainyoufeelsad,itisbesttolearnwhatthings.Learningwillmakeyouforeverremaininvincible.
3楼2014-03-06 12:08:13
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炜少

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
xing_dandan: 金币+1, ★有帮助 2014-03-06 13:26:03
xing_dandan: 金币+1 2014-03-06 14:23:44
你的样品是用流动相配制的吗,你这进样前后泵压变化太大,这个不正常啊,做别的样泵压变化大吗??、
Whenthepainyoufeelsad,itisbesttolearnwhatthings.Learningwillmakeyouforeverremaininvincible.
4楼2014-03-06 13:13:26
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xing_dandan

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 炜少 at 2014-03-06 13:13:26
你的样品是用流动相配制的吗,你这进样前后泵压变化太大,这个不正常啊,做别的样泵压变化大吗??、

样品是用生理盐水配的高浓度,甲醇稀释至100 μg/mL,含水量极少,就是进样后导致的泵压变化很难解释,运行结束后,泵压又恢复170 bar,此时又有类似样品峰出现,求支援啊
天道酬勤*_*
5楼2014-03-06 13:25:29
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haixianyi1

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
xing_dandan: 金币+1 2014-03-06 14:23:34
泵压降低,一般都要与漏有关,看看是不是哪里有漏了。
6楼2014-03-06 13:44:56
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炜少

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by xing_dandan at 2014-03-06 13:25:29
样品是用生理盐水配的高浓度,甲醇稀释至100 μg/mL,含水量极少,就是进样后导致的泵压变化很难解释,运行结束后,泵压又恢复170 bar,此时又有类似样品峰出现,求支援啊...

是不是你进样器出问题了,你可以打客服电话400的那个问一下。
Whenthepainyoufeelsad,itisbesttolearnwhatthings.Learningwillmakeyouforeverremaininvincible.
7楼2014-03-06 13:47:03
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xing_dandan

木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by haixianyi1 at 2014-03-06 13:44:56
泵压降低,一般都要与漏有关,看看是不是哪里有漏了。

应该没漏,进样结束后,柱压又慢慢升到170 bar左右,而且会出现样品峰,很奇怪 啊
天道酬勤*_*
8楼2014-03-06 14:18:29
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xing_dandan

木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 炜少 at 2014-03-06 13:47:03
是不是你进样器出问题了,你可以打客服电话400的那个问一下。...

出现这种现象,进样器一般可能会出现哪些问题呀?
天道酬勤*_*
9楼2014-03-06 14:21:48
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炜少

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
xing_dandan: 金币+1 2014-03-06 16:01:10
你试一下把进样针分别进行load状态和inject状态,看看压力有没有变化。
Whenthepainyoufeelsad,itisbesttolearnwhatthings.Learningwillmakeyouforeverremaininvincible.
10楼2014-03-06 14:26:33
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